《微小RNA-24在肝纖維化中的作用及機制研究》是依託同濟大學，由王菲擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：微小RNA-24在肝纖維化中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王菲
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
肝纖維化是多種慢性肝臟疾病共同的一個病理過程，其可以發展為肝硬化乃至肝衰竭，但是目前依舊缺乏可以有效防治肝纖維化的方法。既往有研究提示了一些微小RNA與肝纖維化的發生相關，但是沒有真正鑑定出一個肝纖維化發生的關鍵微小RNA。我們前期的微小RNA晶片和螢光定量PCR研究提示微小RNA-24在小鼠肝纖維模型中顯著降低，增加微小RNA-24可以促進肝星狀細胞系增殖。本課題擬在此基礎之上，結合肝星狀細胞、肝細胞和動物整體水平的微小RNA-24功能缺失性實驗和功能獲得性實驗，明確其與肝纖維的關係，並藉助基因晶片、生物信息學分析、螢光素酶實驗和免疫印跡法揭示微小RNA-24介導肝纖維化的分子基礎。本課題將鑑定出一個肝纖維化的關鍵微小RNA，並開發出一種新的防治肝纖維化的方法。
結題摘要
肝纖維化是多種慢性肝病的終末階段，晚期可進展至肝硬化，嚴重危害人類健康。本項目在小鼠肝纖維化模型中發現差異性表達的微小RNA-24（microRNA-24，miR-24），運用功能獲得性和缺失性實驗，探討miR-24 對肝纖維化發生時肝星狀細胞（HSC）主要生物學行為的影響。同時，對miR-24調控肝纖維化的分子機制進行探索，揭示肝纖維化的轉錄後調控網路。我們發現在TGF-β刺激大鼠HSC-T6的模型及小鼠肝纖維化模型中，miR-24的表達降低。上調miR-24 抑制HSC的細胞活力、EdU 陽性細胞比例、細胞周期G1期向S期轉化、細胞遷移及TGF-β誘導的HSC活化，下調miR-24 具有相反的作用。靶基因預測、免疫印跡法、雙螢光素酶報告基因實驗以及功能逆轉實驗證實ALK4是miR-24抑制肝星狀細胞激活、增殖的一個靶基因。此外，我們發現過表達miR-24抑制成年小鼠原代肝星狀細胞的增殖和活化，抑制miR-24具有相反的作用。最後，我們發現與健康對照人群相比，肝硬化患者血漿中miR-24含量顯著降低。總之，miR-24在肝纖維化中表達下降，過表達miR-24可以抑制HSC的增殖、遷移及活化，而抑制miR-24具有相反的作用，ALK4是miR-24調控HSC增殖及活化的一個靶基因。本項目說明了miR-24在肝纖維化發生中的作用，為肝纖維化的治療提供了新的策略。
