復壯

復壯，指對已衰退的菌種(群體)進行純種分離和選擇性培養，使其中未衰退的個體獲得大量繁殖，重新成為純種群體的措施。狹義的復壯是一消極措施，一般指對已衰退的菌種進行復壯；廣義的復壯是一積極的措施，即在菌種的生產性狀未衰退前就不斷進行純種分離和生產性狀測定，以在群體中獲得生產性狀更好的自發突變株。菌種退化是指群體中退化細胞在數量上占一定比例後，所表現出群體性能變差的現象。因此，在已經退化的群體中，仍然有一定數量尚未退化的個體。

基本介紹

• 中文名：復壯
• 外文名：rejuvenation
• 類屬：培養措施
• 套用：微生物學
• 對象：對已衰退的菌種(群體)
• 操作：進行純種分離和選擇性培養

方法

純種分離法

在衰退菌種的細胞群中，一般還存在著仍保持原有典型形狀的個體。通過純種分離法，設法把這種細胞挑選出來即可達到復壯的效果。純種分離方法極多，大體可分為兩類，一類較粗放，可達到“菌落純”水平（pure culture in colony level）；另一類較精細，可達到“菌株純”的水平（pure culture in strain level），現表解如下：

純種分離法	菌落純（“菌種純”）	平板表面塗布法
		平板劃線分離法
		瓊脂培養基澆注法
	細胞純（“菌株純”）	用“分離小室”進行單細胞分離
		用顯微操縱器進行單細胞分離
		用菌絲尖端切割法進行單細胞分離
		用雷射鑷子技術從毛細管中分離

通過宿主體內復壯

對於因長期在人工培養基上移種傳代而衰退的病原菌，可接種到相應的昆蟲或動、植物宿體中，通過這種特殊的“選擇性培養基”一至多次選擇，就可從典型的病灶部位分離到恢復原始毒力的復壯菌株。例如，經長期人工培養的Bacillus thuringiensis會發生毒力減退和殺蟲效率降低等衰退現象。這時，就可將已衰退的菌株去感染菜青蟲的幼蟲，然後再從最早、最嚴重罹病的蟲體內重新分離出產毒菌株。

淘汰已衰退的個體

有人發現，若對S. microflavus “5406”農用抗生菌的分生孢子採用-10℃~-30℃的低溫處理5~7天，使其死亡率達到80%左右。結果會在抗低溫的存活個體中留下未退化的個體，從而達到了復壯的效果。

適用情況

一般情況下，對於生產企業，菌種管理都要求對菌種進行定期的分離純化，也就是說分離篩選一般都是在退化之前就進行的一種常規工作，是防止菌種退化或者生產育種而採取的一中積極措施。另外，在出現發酵水平較高和較低的情況下，也會進行菌種的分離篩選。前者的目的是期望從發酵液中分離出高產菌株，而後者則是期望從可能已經退化的種子中分離出尚未退化的菌株。