《從內質網應激介導的CHOP凋亡途徑探討BPD發生機制》是依託江蘇大學，由盧紅艷擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：從內質網應激介導的CHOP凋亡途徑探討BPD發生機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：盧紅艷
- 依託單位：江蘇大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
內質網應激（ERS）是介導細胞適應性生存和凋亡的雙刃劍，但ERS在支氣管肺發育不良（BPD）中作用及機制的研究極少。本項目擬建立高氧暴露早產大鼠BPD模型及肺泡Ⅱ型上皮細胞（AECIIs）高氧暴露細胞損傷模型，從未摺疊蛋白反應（UPR）及影響泛素蛋白酶體活性角度，通過檢測ERS相關蛋白（GRP78/Bip）、UPR跨膜感受器（PERK、IRE1、ATF6）及其促凋亡轉錄因子CHOP、泛素化蛋白表達及蛋白酶體20S活性，利用小分子干擾RNA（siRNA）技術沉默GRP78基因及泛素蛋白酶體抑制劑MG-132干預，探討ERS與BPD發生的關係；同時，設計合成靶向CHOP基因的siRNA阻斷內源性CHOP表達，構建pcDNA3. CHOP-EGFP表達質粒使CHOP過表達，研究CHOP表達改變對AECIIs凋亡的影響，以深化對BPD發病分子機制的認識並為其治療提供明確分子靶標。
結題摘要
支氣管肺發育不良（BPD）是早產兒常見的慢性肺部疾病，目前其發病機制尚不十分明確，且無特效治療手段。因此，深入研究BPD發病機制和防治措施具有重要意義。內質網應激（ERS）是介導細胞適應性生存和凋亡的雙刃劍，但ERS在BPD中作用及機制的研究極少。本項目通過建立高氧暴露早產大鼠BPD模型及肺泡Ⅱ型上皮細胞（AECIIs）高氧暴露細胞損傷模型，通過檢測ERS相關蛋白（GRP78/Bip）、UPR跨膜感受器（PERK、IRE1、ATF6）及其促凋亡轉錄因子CHOP、泛素化蛋白表達及蛋白酶體20S活性，利用小分子干擾RNA（siRNA）技術沉默GRP78基因，探討ERS與BPD發生的關係；同時，設計合成靶向CHOP基因的siRNA阻斷內源性CHOP表達，構建pcDNA3. CHOP-EGFP表達質粒使CHOP過表達，研究CHOP表達改變對AECIIs凋亡的影響，從ERS誘導的CHOP凋亡途徑探討BPD發生機制。研究發現： BPD組及AECIIs高氧暴露組GRP78、ATF4、PERK、CHOP、caspase-12、JNK及泛素相應mRNA及蛋白表達量較空氣組均顯著增加，蛋白酶體活性增強，GRP78、CHOP蛋白表達及總泛素化蛋白表達水平與肺細胞凋亡指數呈顯著正相關。沉默GRP78基因後對高氧暴露A549細胞PERK、IRE1、ATF6表達無明顯影響，但可明顯增加CHOP及細胞凋亡；CHOP過表達下調抗凋亡基因Bcl-2表達，上調促凋亡基因Bax表達，同時增加高氧下A549細胞凋亡，而沉默CHOP基因後對Bcl-2 和Bax 作用相反，提示內質網應激誘導的CHOP凋亡途徑可能參與了高氧致肺上皮細胞損傷病理生理過程。項目研究從內質網應激介導的CHOP凋亡途徑深化了對BPD發病分子機制的認識並為其治療提供明確分子靶標。
