從人源抗體庫亞克隆可溶性抗腫瘤小分子抗體的研究

從人源抗體庫亞克隆可溶性抗腫瘤小分子抗體的研究

《從人源抗體庫亞克隆可溶性抗腫瘤小分子抗體的研究》是依託中南大學,由胡志偉擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

  • 中文名:從人源抗體庫亞克隆可溶性抗腫瘤小分子抗體的研究 
  • 項目類別:青年科學基金項目
  • 項目負責人:胡志偉
  • 依託單位:中南大學
  • 批准號:39700054
  • 申請代碼:H1818
  • 負責人職稱:講師
  • 研究期限:1998-01-01 至 2000-12-31
  • 支持經費:10.5(萬元)
項目摘要
用純化的大腸癌相關抗原(CA-Hb3),從已構建的噬菌體人抗體庫中篩選出大腸癌特異的高親和力的SCFV克隆,其中挑選3個克隆經細胞和組織免疫化學鑑定其特異性與親本抗體Hb3相似,並列入國際基因庫,序號為AFO51165-AF051167。將上述3個克隆質粒載體擴增,酶切,亞克隆入表達載體pET25b(+),經IPTG誘導在宿主菌BL-21(DE3)中表達,分別得到帶6聚但氨酸尾的單鏈抗體,經Western blot鑑定其分子量大小分別為17KD,17KD,7.3KD;同時,用固相金屬離子親和屬析方法純化得到了較純的ScFv,經ELISA鑑定3個克隆求解分子均具有較好的生物學自學成才性。這為今後進行大腸癌的體內診斷和治療研究提供了良好的實驗材料。

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