弓形蟲新毒力因子MAPK的表達特性及功能分析

《弓形蟲新毒力因子MAPK的表達特性及功能分析》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由劉全擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：弓形蟲新毒力因子MAPK的表達特性及功能分析
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：劉全
• 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院

中文摘要

弓形蟲病是一種重要的人獸共患寄生蟲病，嚴重危害人類健康、食品安全和畜牧業生產。目前仍無理想的防治方法。絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）是一類保守的絲氨酸／蘇氨酸蛋白激酶，調節細胞增殖、分化、凋亡等過程。弓形蟲編碼MAPK1和MAPK2，其功能還未見報導。我們通過敲除弓形蟲MAPK1，發現其與蟲體生長發育及致病密切相關，是一種新的毒力因子。本研究擬在前期研究結果基礎上，確定弓形蟲在不同應激條件下MAPK1和MAPK2的表達特性；構建弓形蟲MAPK2缺失株以及MAPK1/2雙基因缺失株或MAPK1缺失/MAPK2條件表達蟲株，比較弓形蟲MAPK基因缺失株的細胞粘附、侵入、增殖、小鼠致病力、包囊形成等的變化，分析弓形蟲MAPK1/2的功能及作用特點，為弓形蟲基因缺失疫苗及MAPK靶向藥物研製奠定基礎。

結題摘要

弓形蟲是一種全球性分布、可感染人及多種動物的機會性致病原蟲，在世界人群中的感染率約為5％～25％，我國平均感染率為7.9%，在某些特殊人群中感染率高達40%以上。近年來，隨著愛滋病等免疫抑制人群的逐年上升，弓形蟲病發病率也隨之升高，已成為一個嚴重的、世界性的公共衛生問題。目前尚無理想的治療藥物。安全、高效的弓形蟲疫苗研製對於控制弓形蟲病具有重要意義，弓形蟲基因缺失疫苗是未來疫苗研製的發展趨勢。 絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MAPKs）是真核細胞內的一類絲氨酸／蘇氨酸蛋白激酶，將細胞外刺激信號轉導至細胞內，在調節細胞增殖、分化、轉化及凋亡等過程中起重要作用。寄生性原蟲作為一類低等真核生物，現已發現存在MAPK信號通路，在蟲體增殖、分化、致病性等方面起重要作用。由於寄生蟲MAPK結構與其宿主MAPK存在明顯差異，MAPK作為寄生蟲病藥物治療靶標而備受關注。 弓形蟲體外誘導緩殖子形成過程中MAPK1表達水平明顯增高，MAPK2蛋白位於蟲體頂端膜表面。通過基因打靶方法構建了MAPK1及MAPK2缺失株，弓形蟲MAPK1缺失株體外緩殖子形成能力減弱，體外細胞粘附能力及增殖明顯減弱。弓形蟲MAPK1缺失株對小鼠的毒力減弱，存活小鼠體內弓形蟲數量明顯減少。TgMAPK2缺失株的增殖能力顯著性減弱，感染小鼠後對小鼠不致死，並且在小鼠體內的增殖數明顯減少。上述研究結果表明，MAPK1及MAPK2是弓形蟲的毒力因子。本項目分析了弓形蟲MAPK的功能及作用特點，為弓形蟲基因缺失疫苗及MAPK靶向藥物研製奠定基礎。