《幽門螺桿菌中富組氨酸蛋白Hpn與膜相互作用及跨膜輸運》是依託中山大學，由葛瑞光擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：幽門螺桿菌中富組氨酸蛋白Hpn與膜相互作用及跨膜輸運
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：葛瑞光
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
幽門螺桿菌是一種寄生在胃黏膜上並能引發B型胃炎、潰瘍以及胃癌的革蘭氏陰性菌。該細菌合成了一種在細胞內占蛋白總量2%的富含組氨酸的小分量蛋白質Hpn，我們課題組過去的研究工作發現該蛋白是幽門螺桿菌中重要的鎳儲運蛋白,並且在過量金屬離子存在的情況下對細菌的起保護作用；進一步的研究工作發現Hpn能夠分泌到幽門螺桿菌體外，在體外形成澱粉樣纖維絲，並且對胃上皮細胞產生一定的毒性。本研究課題著眼於研究Hpn是通過何種渠道分泌到幽門螺桿菌體外，我們將利用生物化學和生物物理方法確定Hpn的分泌通道及其與膜的相互作用，並以此為線索深入研究幽門螺桿菌的致病機理，同時這將為新型抗幽門螺桿菌藥物的研製提供了一定的啟示作用。
結題摘要
幽門螺桿菌是一種寄生在胃黏膜上並能引發B型胃炎、胃潰瘍甚至胃癌的革蘭氏陰性菌。這種細菌合成了一種在細胞內占蛋白總量2%的富含組氨酸的小分子量蛋白質Hpn，我們課題組過去的研究工作發現該蛋白是幽門螺桿菌中重要的鎳儲運蛋白，並且在過量金屬離子存在的情況下對細菌起保護作用；進一步的研究工作發現Hpn能夠分泌到幽門螺桿菌體外並且形成澱粉樣纖維絲，對胃上皮細胞產生一定的毒性。在本課題支持下我們發現Hpn能夠與類膜組分SDS、TFE等互作，蛋白質立體構象發生變化，螺旋比例提高，特別是在酸性環境下作用較強；Hpn與包裹有螢光染料的脂質體相互作用，導致脂質體中的螢光燃料釋放，pH越低，釋放速度越快，證明Hpn與脂類的相互作用損傷膜的完整性。在模擬細胞膜的疏水環境中，Hpn與金屬鎳離子的結合數目減少，結合常數變大，親和力降低，金屬鎳離子和TFE會促進Hpn蛋白的聚集。Hpn與脂質體主要以寡聚體形式相互作用，導致脂質體直徑增大，脂質體膨脹。金屬鎳離子，脂質體所帶電荷及脂肪酸鏈長度都會影響Hpn與脂質體結合的強弱，金屬鎳離子會增強Hpn與脂類的相互作用，Hpn與帶負電荷的脂質體的相互作用較帶中性電荷的脂質體更強，脂肪酸鏈的長度越長，Hpn與脂類的相互作用也越強。通過在大腸桿菌中共表達HopD和Hpn，通過組分收集，證明HopD是Hpn的分泌通道，進一步通過在幽門螺桿菌中敲除HopD得到證明。相關成果對於理解幽門螺桿菌的致病機制具有一定的推動作用。
