幹細胞轉錄因子Sox2與宮頸癌發生髮展關係及其機制研究

《幹細胞轉錄因子Sox2與宮頸癌發生髮展關係及其機制研究》是依託西安交通大學，由冀靜擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：幹細胞轉錄因子Sox2與宮頸癌發生髮展關係及其機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：冀靜
• 依託單位：西安交通大學

項目摘要

Sox2是迄今人們發現最早、也是最重要的維持胚胎幹細胞（ES）多潛能性和自我更新的關鍵基因。最近越來越多的研究表明，Sox2在成體組織及腫瘤組織中表達，可能參與腫瘤的發生髮展。我們的前期研究表明，Sox2蛋白在宮頸原位癌、宮頸浸潤癌中表達明顯高於在正常宮頸組織中的表達；在宮頸鱗癌中其表達隨病理分級的增加而升高。在宮頸癌細胞系中高表達Sox2後， HeLa、SiHa細胞系的細胞增殖能力、克隆形成率及成瘤性均高於對照組。這些結果均提示Sox2在宮頸癌的發生髮展中發揮重要作用，但其下游調節的具體靶分子或信號通路尚未明確，因此有必要對其作用機製做了深一步的研究。本項目旨在通過對Sox2與細胞周期、WNT信號通路的相互作用的研究，試圖闡明Sox2在宮頸癌中的作用機制，並為開闢宮頸癌個性化基因治療提供理論基礎。

結題摘要

本研究採用免疫組化、細胞轉染、Real-time PCR、Western Blotting、螢光素酶報告基因載體等分子生物學、流式細胞儀等手段，在離體組織、細胞及動物實驗的水平，對Sox2在宮頸癌發生髮展中的機製做了初步探討，主要結果如下：（1） Sox2僅在部分正常宮頸基底膜上表達，在宮頸鱗癌組織中高表達，且隨鱗癌病理分級升高而表達增強；在晚期宮頸癌患者(III、Ⅳ期)中，Sox2表達高的患者預後明顯較差，但Sox2表達同患者年齡、臨床分期、淋巴結轉移無相關性；（2）在宮頸癌SiHa細胞中高表達Sox2後發現，SiHa-Sox2的增殖速度明顯快於SiHa-EGFP細胞；細胞周期結果示SiHa-Sox2細胞的S期比例明顯增高，差異具有統計學意義（P＜0.05）。進一步研究分析表明，在宮頸癌中，Sox2通過上調CyclinD1、下調p27Kip1蛋白的表達，加速宮頸鱗癌SiHa細胞的G1→S期轉換進程，促進S期DNA合成，加快細胞周期進程以促進宮頸癌細胞的增殖；（3）細胞劃痕實驗、Transwell小室及遷移實驗表明，SiHa-Sox2細胞較SiHa-EGFP細胞的侵襲和遷移能力明顯增強，提示Sox2促進宮頸癌SiHa細胞的侵襲及遷移；（4）Wnt信號通路中的關鍵基因β-Catenin及C-myc在宮頸鱗癌組織中高表達，提示Wnt信號通路在宮頸癌中異常激活；（5）在宮頸鱗癌中，Sox2的表達同β-Catenin、C-myc的表達均具有相關性。在宮頸癌細胞系中，通過上調或下調Sox2的表達，β-Catenin蛋白表達隨之升高或降低；構建β-Catenin基因的promotor區螢光素酶報告基因載體，進一步研究提示Sox2可能同β-Catenin的promotor相結合，從而激活Wnt信號通路，促進宮頸癌的發生髮展；（6）在高表達Sox2的宮頸癌C33A細胞系中敲除Sox2後，細胞生長速度明顯減慢，且對順鉑的化療作用更為敏感，提示Sox2可能成為宮頸癌治療的一個新靶點。