幹細胞療法靶向治療脈絡膜新生血管

《幹細胞療法靶向治療脈絡膜新生血管》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由王雨生擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：幹細胞療法靶向治療脈絡膜新生血管
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：王雨生
• 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學

中文摘要

文獻報導和本研究組工作證實，骨髓來源細胞（BMCs）通過基質衍生因子1-趨化因子受體4的趨化作用移行至脈絡膜新生血管（CNV）區域，參與CNV形成。BMCs因其定向移行能力可望作為藥物載體實現CNV的靶向治療，但參與CNV的具體細胞類型尚不明確。本項目從探討BMCs中參與CNV的具體幹細胞類型入手，著重研究經基因修飾後的載體幹細胞特異性趨化、靶向治療CNV的潛能。利用幹細胞分離培養、流式分析、移行分析、脈絡膜鋪片和螢光活體成像等方法，探討各種幹細胞的移行能力和參與CNV生成的情況；利用腺病毒基因轉導和流式分選，實現幹細胞的基因修飾和目的蛋白的高效表達；利用細胞共培養體系、CNV動物模型、組織學觀察和視覺電生理檢查等，觀察基因修飾過的幹細胞在體內外抑制CNV、保護視網膜的作用。從全新的角度探索幹細胞結合基因療法用於CNV靶向治療的潛能，為CNV相關眼病的治療提供新策略。

結題摘要

文獻報導和本研究組工作證實，骨髓來源細胞（BMC）可動員趨化移行至脈絡膜新生血管（CNV）區域，參與CNV形成，但參與CNV的具體細胞類型尚不明確。本研究組推測，BMC因其定向移行能力可望作為藥物載體實現CNV的靶向治療。“幹細胞向CNV的特異趨化”是整體項目“CNV細胞療法”實施的基礎，是研究的重點，因此，在項目實施過程中，本研究組從探討BMC中參與CNV生成的具體幹細胞類型入手，觀察了動物模型體內幹細胞參與CNV生成的全過程，比較了BMC中各幹細胞類型向CNV趨化的特異性，進而篩選獲得良好的細胞載體。在對這一基礎的論證中，我們結合採用了經典的組織學方法和新興細胞影像技術—活體螢光成像觀察BMC在動物CNV模型體內的生物學行為。活體螢光成像提供對體內骨髓細胞的實時追蹤，大大拓展了我們對BMC參與CNV生成的全動態過程的了解；組織學為活體螢光成像的發現提供進一步的確鑿證據，使我們對此“基礎” 達到多層面多角度的論證，同時也從技術層面上提高了本項目的研究水平。通過這一部分研究，證實了骨髓基質幹細胞（MSC）相對於其他種類骨髓來源幹細胞具有向CNV的特異趨化能力，確立了MSC是後續治療研究的良好細胞載體。同時，我們還對MSC特異趨化的機制進行了探索，從分子角度進一步驗證MSC的趨化能力和動態過程。此後，本研究組利用腺病毒基因轉導技術，實現了MSC的基因修飾和抗新生血管形成蛋白的高效表達，建立了保留向CNV特異趨化能力又能高表達抗新生血管形成因子的細胞載體。通過常規靜脈輸入，此基因修飾過的MSC載體能夠特異趨化至動物CNV病損內，成功抑制CNV的發生髮展，最終證實了結合基因療法和幹細胞療法對CNV進行靶向治療的可行性。另外，作為對本項目研究內容的補充，我們還研究了衰老、高血糖情況下幹細胞參與CNV生成情況及其可能的機制。該部分研究將為幹細胞療法用於複雜病情患者CNV治療提供必要的理論和研究基礎。綜上所述，本項目證實了幹細胞向CNV的特異趨化現象，利用這一現象並結合幹細胞的體外修飾，可達到CNV的靶向治療。本項目從全新的角度探索了幹細胞結合基因療法用於CNV靶向治療的潛能，為CNV相關眼病的治療提供了新策略。該療法不但可望套用於一般情況下CNV的治療，而且在伴隨其他全身病理狀態時（如高血糖、衰老），也具有一定可行性。