《尿調蛋白影響慢性腎臟病進展的機制研究》是依託北京大學，由陳育青擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：尿調蛋白影響慢性腎臟病進展的機制研究
- 項目負責人：陳育青
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
研究提示尿調蛋白(UMOD)基因和慢性腎臟病(CKD)的發生進展相關。UMOD是特異表達於腎臟的糖蛋白，有免疫調節功能；UMOD 基因敲除的鼠模型腎間質纖維化嚴重，接受腎移植者,尿UMOD糖基化異常並影響其免疫調節功能。我們前期工作：UMOD基因和血壓，血尿酸相關，尿UMOD濃度和CKD人群腎功能下降有關。本研究擬探討UMOD表達，分泌和糖基化修飾影響CKD進展的機制。檢測腎組織UMOD及糖基化相關基因表達譜，腎組織UMOD蛋白表達水平，尿UMOD糖基化異常的種類及分布，研究UMOD在各個水平影響CKD進展的機制。體外培養腎小管上皮細胞，SiRNA 抑制UMOD基因表達，分析腎小管細胞增值和凋亡的變化。分析糖基化異常的UMOD免疫調節功能的改變，如與炎症因子結合力，對免疫細胞的調節等。該研究將從機制上闡明UMOD影響CKD進展中的作用，為UMOD成為CKD進展的診斷治療的新靶點提供理論依據
結題摘要
慢性腎臟病（CKD）是嚴重危害人類健康的疾病。阻止和延緩其進展十分重要。文獻和我們前期研究結果提示，尿調蛋白在CKD的進展中起重要作用。本研究從尿調蛋白表達/分泌和糖基化的不同層次探討尿調蛋白影響慢性腎臟進展的機制。研究內容包括（1）利用疾病人群，探討及驗證尿調蛋白腎臟的表達/分泌及糖基化修飾對慢性腎病進展的影響；探討尿調蛋白水平和糖基化情況作為CKD進展的生物學標誌物的可能性。（2）體外功能實驗，探討尿調蛋白腎臟表達/分泌及糖基化修飾對慢性腎病進展的影響機制。第一個重要結果，發現了尿調蛋白在CKD進展中新的機制：（1）我們利用間歇性缺氧大鼠模型和低氧培養腎小管上皮細胞模型，證實了低氧時Hif-1α表達增加導致了尿調蛋白的表達和分泌增加，並用EMSA的方法直接證實了Hif-1α為尿調蛋白新的轉錄調控因子。這一發現不僅為Hif-1α調控的蛋白質又增加了新的成員，同時也提示尿調蛋白在CKD中起重要作用（待發表）； （2）我們首次證實了尿調蛋白和補體H因子存在直接相互作用。使用共聚焦顯微免疫螢光染色證實H因子和尿調蛋白共表達於腎組織，利用體外結合實驗證實H因子和尿調蛋白可特異性結合，這種結合使H因子裂解C3b的功能增強（J Cell Mol Med. 2016;20(10):1821-1828. PLoS One. 2015;10(6): e0126812.）。我們還利用前期課題組發現的新尿調蛋白的基因突變，構建了突變蛋白表達質粒，證實了突變的尿調蛋白在細胞內質網中瀦留，可對尿調蛋白的功能產生影響 （Gene. 2013;531(2):363-369.）。第二個重要結果，在疾病人群和動物模型中探討了尿調蛋白水平和糖基化改變作為腎損傷標誌物的可能：（1）我們利用大鼠間歇缺氧模型，發現在間歇缺氧的情況下，大鼠常規腎損傷指標和腎組織光鏡檢查均無顯著的改變，而電鏡表現為線粒體損傷和尿尿調蛋白的表達及分泌增加（待發表）。在IgA腎病患者中發現尿尿調蛋白的水平降低和IgA腎病的進展相關。建立了尿調蛋白糖基化 Lectin-ELISA的檢測方法，並在CKD和急性腎損傷患者中發現尿調蛋白某些糖基較正常人群減少（待發表）。上述的研究結果提示尿調蛋白水平和糖基化情況可作為腎損傷的早期標誌物。該研究從機制上證實尿調蛋白在CKD進展中的重要作用，也提示尿調蛋白可作為新的腎損傷標誌物，有重要的臨床套用前景。
