《小鵝瘟診斷技術(NY/T 560-2002)》的附錄A、附錄B均為規範性附錄。本標準由農業部畜牧獸醫局提出。本標準由全國動物檢疫標準化技術委員會歸口。本標準起草單位：揚州大學畜牧獸醫學院。本標準主要起草人：王永坤、嚴維巍、朱國強、周繼宏、莊國宏。
基本介紹
- 外文名：Diagnostic Techniques for Gosling Plague
- 書名：小鵝瘟診斷技術
- 作者：中華人民共和國農業部
- 出版日期：2002年12月1日
- 語種：簡體中文
- ISBN：155066214776
- 出版社：中國標準出版社
- 頁數：2頁
- 開本：16
內容簡介,文摘,
內容簡介
《小鵝瘟診斷技術(NY/T 560-2002)》由中國標準出版社出版。
文摘
著作權頁：
3 瓊脂擴散試驗
3.1 材料準備
3.1.1 標準陽性血清、抗小鵝瘟病毒單克隆抗體、標準陰性血清。
3.1.2 標準瓊擴抗原。
3.1.3 被檢血清，無菌手續採取血液，分離血清，按0.01%量加入硫柳汞防腐，凍結保存待檢。
3.1.4 被檢抗原：製備方法見附錄A。
3.1.5 瓊脂板：取1.0g優質瓊脂或瓊脂粉加100mL pH7.8的8%氯化鈉溶液，加熱使其完全溶解後加入1mL 1%的硫柳汞溶液混勻製成3mm厚的平板。
3.2 操作方法
3.2.1 檢測抗體
3.2.1.1 打孔：將製備好的瓊脂板按模板用打孔器打孔，並挑出孔中的瓊脂。中心1孔，周圍6孔，孔徑3mm，孔距4mm，用熔化瓊脂補孔底。
3.2.1.2 加樣：中央孔加入標準瓊擴抗原，1、4孔加入標準陽性血清，其他孔分別加入被檢血清，或1孔加入標準陽性血清，其他孔分別加入倍增稀釋被檢血清。各孔均以加滿不溢出為度。將加樣後的瓊脂板放入填有濕紗布的盒內，置20℃～25℃室溫或37℃溫箱，24h初判，72h終判。
3.2.1.3 結果判定：
a）當標準陽性血清孔與抗原孔之間形成清晰沉澱線時，被檢血清孔與抗原孔之間也出現沉澱線，且與標準陽性血清沉澱線末端相吻合，即被檢血清判為陽性。
b）當標準陽性血清孔與抗原孔之間形成清晰沉澱線時，而被檢血清孔與抗原孔之間無沉澱線出現時，即被檢血清判為陰性。
c）當被檢血清最高稀釋度孔與抗原孔之間形成清晰沉澱線時，即判為被檢血清瓊擴效價。
3.2.2 檢測抗原
3.2.2.1 打孔：同3.2.1.1。
3.2.2.2 加樣：中央孔加標準陽性瓊擴血清，1、4孔加入標準瓊擴抗原，其他孔加被檢抗原。各孔均以加滿不溢出為度。將加樣後的瓊脂板放入填有濕紗布的盒內，置20℃～25℃室溫或37℃溫箱，24h初判，72h終判。
3.2.2.3 結果判定：當標準抗原孔與陽性血清孔之間形成清晰沉澱線時，被檢抗原孔與陽性血清孔之間也出現沉澱線，且與標準抗原沉澱線末端相吻合，即被檢抗原判為陽性。
當標準抗原孔與陽性血清孔之間形成清晰沉澱時，被檢抗原孔與陽性血清孔之間無沉澱線出現，即被檢抗原判為陰性。
4 中和試驗（鵝胚中和試驗）
4.1 材料準備
4.1.1 標準陰性血清。
4.1.2 標準小鵝瘟病毒株（SYG61株）。
4.1.3 被檢血清，無菌手續採取血液，分離血清，經56℃30min滅活，—20℃保存備用。
4.1.4 稀釋液，可採用滅菌漢克氏（Hanks）液或滅菌生理鹽水。
3 瓊脂擴散試驗
3.1 材料準備
3.1.1 標準陽性血清、抗小鵝瘟病毒單克隆抗體、標準陰性血清。
3.1.2 標準瓊擴抗原。
3.1.3 被檢血清，無菌手續採取血液，分離血清，按0.01%量加入硫柳汞防腐，凍結保存待檢。
3.1.4 被檢抗原：製備方法見附錄A。
3.1.5 瓊脂板：取1.0g優質瓊脂或瓊脂粉加100mL pH7.8的8%氯化鈉溶液，加熱使其完全溶解後加入1mL 1%的硫柳汞溶液混勻製成3mm厚的平板。
3.2 操作方法
3.2.1 檢測抗體
3.2.1.1 打孔：將製備好的瓊脂板按模板用打孔器打孔，並挑出孔中的瓊脂。中心1孔，周圍6孔，孔徑3mm，孔距4mm，用熔化瓊脂補孔底。
3.2.1.2 加樣：中央孔加入標準瓊擴抗原，1、4孔加入標準陽性血清，其他孔分別加入被檢血清，或1孔加入標準陽性血清，其他孔分別加入倍增稀釋被檢血清。各孔均以加滿不溢出為度。將加樣後的瓊脂板放入填有濕紗布的盒內，置20℃～25℃室溫或37℃溫箱，24h初判，72h終判。
3.2.1.3 結果判定：
a）當標準陽性血清孔與抗原孔之間形成清晰沉澱線時，被檢血清孔與抗原孔之間也出現沉澱線，且與標準陽性血清沉澱線末端相吻合，即被檢血清判為陽性。
b）當標準陽性血清孔與抗原孔之間形成清晰沉澱線時，而被檢血清孔與抗原孔之間無沉澱線出現時，即被檢血清判為陰性。
c）當被檢血清最高稀釋度孔與抗原孔之間形成清晰沉澱線時，即判為被檢血清瓊擴效價。
3.2.2 檢測抗原
3.2.2.1 打孔：同3.2.1.1。
3.2.2.2 加樣：中央孔加標準陽性瓊擴血清，1、4孔加入標準瓊擴抗原，其他孔加被檢抗原。各孔均以加滿不溢出為度。將加樣後的瓊脂板放入填有濕紗布的盒內，置20℃～25℃室溫或37℃溫箱，24h初判，72h終判。
3.2.2.3 結果判定：當標準抗原孔與陽性血清孔之間形成清晰沉澱線時，被檢抗原孔與陽性血清孔之間也出現沉澱線，且與標準抗原沉澱線末端相吻合，即被檢抗原判為陽性。
當標準抗原孔與陽性血清孔之間形成清晰沉澱時，被檢抗原孔與陽性血清孔之間無沉澱線出現，即被檢抗原判為陰性。
4 中和試驗（鵝胚中和試驗）
4.1 材料準備
4.1.1 標準陰性血清。
4.1.2 標準小鵝瘟病毒株（SYG61株）。
4.1.3 被檢血清，無菌手續採取血液，分離血清，經56℃30min滅活，—20℃保存備用。
4.1.4 稀釋液，可採用滅菌漢克氏（Hanks）液或滅菌生理鹽水。
