《小細胞肺癌相關的miRNA-375靶基因Runx1的鑑定和功能研究》是依託復旦大學，由劉亞嵐擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：小細胞肺癌相關的miRNA-375靶基因Runx1的鑑定和功能研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：劉亞嵐
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
我們前期已通過雷射捕獲顯微切割（LCM）及miRNA 晶片技術，篩選出與小細胞肺癌（SCLC）顯著差異表達的microRNA分子標誌物miR-375；通過運用資料庫分析及對LCM收集的50例SCLC組織進行靶基因的篩選和qRT-PCR驗證，確定了包括Runx1在內的6個癌相關靶基因。本研究擬通過與轉染相結合的qRT-PCR、Western-blot和螢光素酶活性檢測法對Runx1進行鑑定；通過增殖、凋亡、侵襲、遷移等實驗，檢測miR-375對SCLC細胞株的具體生物學作用，並檢測Runx1的表達變化；同時利用轉染miR-375的SCLC細胞株分析Runx1的具體生物功能；在差異表達Runx1的SCLC細胞株中檢測Stat3信號通路相關腫瘤因子的mRNA和蛋白表達，初步探討SCLC中Runx1與Stat3信號通路的關係。為SCLC的治療新靶點提供分子理論依據。
結題摘要
本項目經過3年努力,已順利完成實驗研究。通過雷射顯微分離技術從82例肺癌中分離出純淨的肺癌細胞,運用Agilent晶片技術進行全基因組miRNA差異表達分析, 篩選出22個在不同類型肺癌中顯著差異表達的miRNA。通過miRecords及KEGG資料庫分析,我們初步篩選出miR-375的37個候選靶基因可能參與調節SCLC的已知相關信號通路; 運用qRT-PCR法,我們對37個基因在50例顯微切割的SCLC標本中進行了組織水平的驗證。結果顯示,包括Runx1、ITPKB在內的6個基因為SCLC中miR-375的目的靶基因。通過與轉染實驗相結合的螢光定量RT-PCR、Western-blot和螢光素酶活性檢測實驗進行功能研究，預測並驗證了miR-375的靶基因ITPKB。通過細胞增殖實驗證實miR-375可通過靶基因ITPKB促進細胞增殖。結合已報導的ITPKB在細胞調控中的多種作用,提示miR-375在SCLC發病分子機制中具有重要作用,並有望成為SCLC診斷與治療的潛在靶點。 項目期間，作為第一作者發表SCI論文2篇，其中直接相關SCI論文1篇 (PLOS ONE,影響因子3.234分)。2016年被評為第一屆全國衛生產業企業管理協會實驗醫學專家委員會病理專業委員會委員; 課題培養碩士研究生1名。
