《小窩蛋白-3在PKC Eplison 介導缺血預適應心臟保護中的作用機制》是依託吉林大學，由孫巍擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：小窩蛋白-3在PKC Eplison 介導缺血預適應心臟保護中的作用機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：孫巍
- 依託單位：吉林大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
小窩蛋白-3（Cav-3）在缺血預適應動物模型中顯示出心臟保護作用。Cav-3在細胞膜小窩中不僅起支架作用，還能調節信號蛋白的活化，是參與心肌保護作用關鍵蛋白的交匯點。蛋白激酶Ce（PKCe）在缺血預適應心臟保護中具有重要地位，前期工作證明：Cav-3 和PKCe共表達在細胞膜同一位置，通過調節腺苷A1受體促使PKCe轉位進入細胞膜小窩，但PKCe進入小窩後與Cav-3是如何偶聯的尚不清楚。已知Cav-3可與PKC信號通路中的KATP通道偶聯並調節其活性，推測Cav-3在PKCe介導的缺血預適應中通過與KATP通道偶聯發揮心臟保護作用。為了確認這種推測並研究其可能的分子機制，我們擬圍繞Cav-3與KATP通道偶聯，研究Cav-3與PKCe偶聯、活化及轉位的關係，利用計算機軟體分析Cav-3與KATP通道的偶聯活性位點，利用體內外模型揭示心肌缺血預適應中Cav-3與PKCe的偶在線上制。
結題摘要
蛋白激酶C（PKC）與小窩蛋白-3（Cav-3）在缺血缺氧預適應動物模型中顯示出心臟保護作用，但二者介導的保護作用的確切機制尚不明確，Cav-3在細胞膜小窩中不僅起支架作用，還能調節信號蛋白的活化，是參與心肌保護作用關鍵蛋白的交匯點。我們通過套用成年大鼠心肌細胞及H9C2細胞系構建細胞缺血缺氧預適應模型，發現預適應可以促使PKCε, PKCδ 和 PKCα從細胞漿內轉位至細胞膜Cav-3富集的區域, 而PKCβ和PKCζ不發生以上情況；通過免疫共沉澱實驗表明缺氧預適應情況下PKCε, PKCδ or PKCα均可與Cav-3發生偶聯；課題組進一步通過螢光共振能量轉移實驗(fluorescence resonance energy transfer,FRET)發現PKCε-YFP與Cav-3-CFP可以發生FRET現象，表明PKCε在缺氧預適應情況下從細胞漿轉位至細胞膜上與Cav-3發生偶聯。本課題圍繞細胞膜Cav-3與PKC偶聯，研究Cav-3與PKCε偶聯、活化及轉位的關係，進一步利用計算機軟體分析Cav-3與PKC的偶聯活性位點，利用體內外模型揭示心肌缺血缺氧預適應中Cav-3與PKCε的偶在線上制這種心臟保護調節機制。
