《小動物PET對腫瘤幹細胞的可視化研究》是依託華中科技大學，由安銳擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：小動物PET對腫瘤幹細胞的可視化研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：安銳
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
研究證明，腫瘤幹細胞在腫瘤的發生、轉移和復發中起重要作用，腫瘤幹細胞的作用機制及通過靶向腫瘤幹細胞治療腫瘤是當前研究熱點，但現擁有的對腫瘤幹細胞研究方法多為體外技術，存在一定局限性。.本研究擬以基因工程技術獲得前列腺癌幹細胞的特異性表面抗原PSCA的單鏈抗體，進行放射性核素Cu-61標記，分析標記產物的穩定性和生物活性；建立原位前列腺癌小鼠模型，在腫瘤生長的不同時期以Cu-61標記的單鏈抗體作為示蹤劑，對原發腫瘤和轉移部位的前列腺癌幹細胞進行準確的定性和定位，並結合體外檢測技術，對小動物PET顯像結果進行對比分析。為活體研究腫瘤幹細胞的作用機制以及特點提供一種無創影像技術，並結合病灶的最大標準攝取值對前列腺癌幹細胞進行準確定量，為將來靶向腫瘤幹細胞治療的藥物劑量和停藥時間選擇提供理論依據。
結題摘要
腫瘤幹細胞（CSCs）是腫瘤中具有自我更新、分化、腫瘤形成和耐藥性特點的一個群體。目前，在體腫瘤幹細胞的監測和顯像是極具挑戰性並非常有意義的。 方法：本研究的目的是利用裸鼠移植瘤模型，靶向定位131I標記的結直腸腫瘤幹細胞標誌物--CD133特異性單克隆抗體，即AC133單克隆抗體。方法：在結直腸惡性腺瘤細胞（LOVO細胞系）中，用磁性細胞分離系統分選出CD133（+）細胞和CD133（-）細胞。其中CD133（+）細胞、CD133（-）細胞和未分選的 LoVo細胞分別培養並種植在裸鼠下肢皮下（n=5）。利用Iodogen的方法，131I標記AC133單克隆抗體，並於純化後檢測其放射性化學純度。並對三種細胞分別進行細胞結合試驗的研究。移植瘤裸鼠模型進行SPECT/CT顯像。同時，還進行體外實驗，生物分布實驗，免疫螢光，放射自顯影及Western-blot法檢測等。結果：放射性標記的化合物（131I-AC133單克隆抗體）在體外實驗中具有較好的穩定性、特異性及免疫活性。131I-AC133單克隆抗體在CD133（+）細胞和未分選Lovo細胞的裸鼠移植瘤模型中有明顯的濃聚，但是在CD133（-）細胞和阻斷組裸鼠移植瘤模型中幾乎沒有攝取。生物分布實驗研究顯示，在注射了131I-AC133單克隆抗體後的第七天，CD133（+）細胞、CD133（-）、未分選LoVo細胞和特異性阻斷組裸鼠移植瘤模型中，131I-AC133單克隆抗體的腫瘤攝取分別是6.97 ± 1.40%ID/g, 1.35 ± 0.48, 6.12 ± 1.91and 1.61 ± 0.44 %ID/g (n = 4)。免疫螢光、放射自顯影和Western-blot結果，進一步證實了131I-AC133單克隆抗體與CD133（+）腫瘤的特異性結合。 結論：本研究通過體內和體外實驗，證實了放射性標記的AC133.1單克隆抗體靶向定位腫瘤幹細胞的可行性，並為腫瘤幹細胞無創性顯像提供了一種新的方法。
