《小分子配體與hnRNP A1的相互作用及其調控活化T細胞的研究》是依託南京大學，由徐強擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：小分子配體與hnRNP A1的相互作用及其調控活化T細胞的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：徐強
- 依託單位：南京大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
基於前一自然基金重點項目發現小分子Astilbin的靶蛋白核不均一核糖核白A1(hnRNP A1，以下稱A1)及其介導的T細胞從活化向凋亡轉向事件，本項目擬選擇Astilbin的非色酮衍生物，從結構及與A1結合的角度最佳化A1的小分子配體；在A1條件性敲除小鼠及其T細胞上，觀察A1缺失對T細胞活化中Akt、p38通路的影響及細胞從活化向凋亡轉換的影響；藉助A1的非磷酸化突變S192A、S199A，擬磷酸化突變S192D、S199D和小分子結合位點突變L102A、K179A等，探討小分子與A1結合的分子基礎，建立小分子與A1蛋白功能域相互作用的評價方法；探討小分子通過A1誘導活化T細胞凋亡的分子機制及其對實驗性腦脊髓炎、膠原性關節炎等的治療作用。為活化T細胞的凋亡轉向提供新的理論詮釋，明確A1介導的活化T細胞向凋亡轉向的事件作為免疫抑制劑新靶標的地位，為新型先導化合物或候選藥物的發現打下基礎。
結題摘要
我們的前期研究發現了小分子化合物Astilbin的靶蛋白——核不均一核糖核蛋白A1(hnRNP A1)，並證實其可介導T細胞從活化轉向凋亡。在此基礎上，本項目合成了多種Astilbin衍生物，最佳化了hnRNP A1 的小分子配體；藉助hnRNP A1 的截短變體(J1-J4)和位點突變體(L102A、K179A)等，探討了小分子與hnRNP A1 結合的分子基礎，結果提示hnRNP A1的RGG-M9-F domain應該是這些小分子的主要結合域；進一步闡明了Astilbin誘導活化T細胞轉向凋亡的機理，即hnRNP A1在Astilbin的作用下向線粒體轉位，並與線粒體膜孔道蛋白VDAC結合，從而開啟線粒體凋亡通路；在T細胞上敲除hnRNP A1能夠顯著抑制Astilbin的選擇性誘導活化T 細胞凋亡的作用，說明Astilbin的選擇性作用系通過靶向hnRNP A1而實現；在T 細胞條件性敲除 hnRNP A1小鼠上，實驗性腦脊髓炎的發病和炎症浸潤均明顯降低。此外，我們還研究了巨噬細胞中hnRNP A1的功能，發現hnRNP A1能夠調控巨噬細胞M1極化，進而影響脂肪組織炎症狀態和整體的胰島素抵抗水平。通過本項目的研究，明確了 hnRNP A1 的小分子可靶向性，其介導的活化 T 細胞向凋亡轉向作用可作為免疫抑制劑的新型靶標，本項目針對其小分子配體的研究為先導化合物或候選藥物的發現打下了基礎。已發表SCI論文9篇，其中影響因子大於5的有4篇，待發表數篇。
