封固劑

封固劑又稱婊媒，顧名思義，它既能使染色後的組織封固於載玻片和蓋玻片之間，不使直接與空氣接觸，避免氧化褪色。另一方面使組織切片在封固劑的充實下，其折光率能和玻片的折光率相近，從而獲得清晰的鏡檢效果

基本介紹

• 中文名：封固劑
• 外文名：mounting agent
• 作用：組織學製片在蓋玻片下封固
• 分類：含水封固劑無水封固劑

作用

由於組織學製片需隨時檢查或保存，故要在蓋玻片下封固。

作用原理

教學和科研用的切片有的需要反覆觀察和長期保存，故要求所用封固劑是近於中性、無色或微有顏色的，其折光率與所用的載玻片、蓋玻片、透明劑等的折光率相近。因折折光率與透明度成正比，與未著色的組織識別力成反比，若封固劑的折光率高於組織，則透明度較佳，但識別力較差；反之，若折光率低於組織，則透明不良，但未染色部的識別較為清楚。未染色組織最好用有很高或很低折光率的封固劑封固。而染色的切片則以折光率在1．52至1．54之間的封固劑封固則透明度最佳。

封固劑分類介紹

含水封固劑

⒈優點：省去脫水、透明的步驟，材料由70%酒精中取出後可直接封固，操作簡單，可防止水分含量大的組織在脫水過程中收縮。因此，很多藻類、真菌、苔蘚及胚囊材料常用此類封固劑。

缺點：封固後容易失水，引起封固劑乾縮或形成結晶，封固不堅固。

⒉主要的含水封固劑

⑴、阿拉伯樹膠

配方：

阿拉伯樹膠40克，蒸餾水40毫升，甘油20毫升

先將阿拉伯樹膠放入水中溶化，然後加入甘油，再加少許石炭酸以防腐。

⑵、甘油明膠封固劑（甘油明膠常用於脂肪染色的冰凍切片）

1）甘油明膠為含水封固劑 ， 用於不能使用油溶性封固劑的組織切片。組織切片不必經過脫水、透明等步驟即可封固，因此使用方便。但用含水封固劑封固的切片在梅雨季節，易受真菌侵襲而損壞，所以難以長期保存。其折光率為1.47，是脂肪染色的標準封固劑。

2）配製方法為：取蒸餾水60 mL置於三角燒瓶內，秤取化學純的明膠l0g放人蒸餾水中，加熱融化，再各加化學純的甘油70mL、苯酚0.25g，不時攪拌，直至溶液混合均勻為止。配製好後裝在試劑瓶中.備用，臨用前將甘油明膠放入溫箱，融化後即可封片。

⑶、Apath糖漿（用於證明澱粉樣變的結晶染色法中）

無水封固劑

⒈綜述

⑴、無水封固劑系將一種樹脂（天然或合成的）溶於其天然溶劑或二甲苯內直至呈適當的易 乾易凝的流體狀以便封固。其粘稠度以便易排除氣泡且在蓋玻片與切片之間能自由流動 為好，稍稠一點則可避免乾燥後在蓋玻片下形成空氣間隙。中性樹膠是很好的封固劑， 不僅折光率（1．52）及色散作用都近似於玻璃，而且在很薄一層時幾乎是完全無色透　 明。用以封存HE染色的切片則色彩非常鮮艷。乾 固後即變硬，能把蓋玻片和載玻片緊緊 地粘在一起。僅有的缺點是隨著保存時間的延長，樹膠逐漸使二甲苯氧化，產生甲苯酸及 鄰苯二甲酸能使鹼性染料褪色。

⑵、冰凍和火棉膠切片的封固，使用時組織切片必須脫水，透明徹底，使用無水封固劑，不 然片中會出現雲霧狀混濁，妨礙鏡檢。

⑶、因酸或鹼性封固劑均可引起組織切片的褪色，故宜用中性封固劑。

無水封固劑有中性樹膠，大馬樹脂及人工樹脂等。

⑷、封固劑應保存於有色瓶中避免日光照射，並存放於暗處以防酸變。

⒉加拿大樹膠

⑴、加拿大樹膠的性狀：

淺黃至微綠色、粘性、透明、微有螢光的液體。有愉快香氣。味苦。露置空氣中漸變為固態的非結晶物質。能與苯、氯仿、二甲苯、乙酸乙酯和香柏油等混溶。溶於乙醇、乙醚、松節油和石油醚，不溶於水。相對密度0.987～0.994。折光率（n20D)1.52～1.54。

⑵、用途：

生化研究，鏡片及蓋玻片膠粘，貼附顯微鏡標本。用作清漆。加拿大樹膠溶於二甲苯後，它的折光率是1.52，接近於玻璃的折光率（1.51），透明度很好，用以封片幾乎無色，乾後堅硬牢固，可長期保存。因此，它是封片常用的封藏劑。市售的加拿大樹脂有濃液體和固體兩種。如果是固體，可以在樹膠中加入約相當於樹膠體積一半量的二甲苯，放在溫暖處，時常攪拌，促使樹膠溶化。溶化後的較液濃度以膠液能沿玻璃棒一端順利下流為宜（如果要封藏後使它乾燥更快，可用苯代替二甲苯）。

⑶、加拿大樹膠在使用和貯存時應注意：

a不能加熱，否則樹膠立即變成深褐色，影響封片後的觀察

b樹膠應貯存在棕色瓶內，避光保存

c玻璃瓶口應密閉，以防蒸發凝固

d為了防止樹膠變酸，在樹膠內加入幾小塊用二甲苯清洗過的大理石，以中和酸性

⒊達馬樹膠

為松柏科植物——柳安所分泌的一種白色微帶淡黃的半透明樹脂。能溶於二甲苯、苯、松 節油、氯仿和250毫升二甲苯中。過濾、待蒸發到100毫升時即可使用。此封固劑的折不 率為1.52，能長期保存中性，封固作用好於加拿大樹膠。

⒋一種用松香配製的封固劑

配製方法如下：

松香 12 g

純酒精 5ml

松節油 5ml

選擇

選擇一種封固劑，應以對所用的各種染色劑不褪色為原則。

如用鹼性苯胺染料染色需封固於不含酸的封固劑內。象普魯士藍反應的切片應封固於非還原性封固劑內。

對於石蠟，冰凍和火棉膠切片的封固，使用時組織切片必須脫水，透明徹底，不然片中會出現雲霧狀混濁，妨礙鏡檢。

無水封固劑系將一種樹脂（天然或合成的）溶於其天然溶劑或二甲苯內直至呈適當的易乾易凝的流體狀以便封固。其粘稠度以便易排除氣泡且在蓋玻片與切片之間能自由流動為好，稍稠一點則可避免乾燥後在蓋玻片下形成空氣間隙。

參考文獻

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