《實用神經變性疾病生物學實驗方法與技術》是2016年化學工業出版社出版的圖書，作者是潘曉東。
基本介紹
- 書名：實用神經變性疾病生物學實驗方法與技術
- 作者：潘曉東
- 出版社：化學工業出版社
- 出版時間：2016年
- ISBN：9787122276018
內容簡介,圖書目錄,
實驗前該準備哪些試劑？怎么配製實驗試劑？實驗前該準備哪些儀器？怎么培養海馬神經元？怎么觀察神經元的形態學？怎么鑑定神經元？怎么培養小鼠中腦多巴胺能神經元？怎么培養神經幹細胞？怎么培養原代神經膠質細胞？怎么測定小膠質細胞趨化、遷移、吞噬功能？怎么測試實驗動物的學習和記憶？怎么檢測基因晶片？怎么做神經免疫組織化學和免疫螢光染色？怎么套用Image J 神經生物分析軟體、GraphPad Prism 6.0軟體、SPSS軟體？……本書圖文結合予一一介紹。實驗流程嚴格按照美國國立衛生研究院（NIH）、國立老化研究所（NIA）的標準、規範執行。內容實用，具有可操作性。
本書適合從事神經病學研究的人員，如神經內科、神經外科醫師、研究生、醫學院校基礎研究人員，特別適合初學者閱讀參考。
第一章 原代神經細胞培養和細胞功能測定 / 1
第一節 原代皮質和海馬神經元培養 1
第二節 新生小鼠中腦多巴胺能神經元培養 3
一、單層皮質星形膠質細胞表面培養新生鼠中腦多巴胺能神經元 3
二、單層星形膠質細胞表面培養新生鼠中腦多巴胺能神經元及形成
神經突觸 9
三、本節實驗中使用到的試劑和溶液 11
四、注意事項 13
五、常見問題及解決方案 13
六、預期結果 13
七、時間因素 14
第三節 小鼠神經幹細胞培養 14
一、成年鼠神經幹細胞培養 14
二、新生鼠海馬神經幹細胞的培養 19
三、胎鼠神經幹細胞的培養 20
第四節 原代神經膠質細胞培養 21
一、星形膠質細胞的分離和培養 21
二、新生鼠小膠質細胞的原代培養 23
三、成年鼠小膠質細胞的分離和培養 25
第五節 小膠質細胞功能實驗 29
一、趨化和遷移實驗 29
二、體外測定小膠質細胞吞噬功能（吞噬尼羅紅微球/a突觸核蛋白/Ab） 30
第二章 模式動物行為學實驗 / 34
第一節 Morris水迷宮 34
第二節 Y-迷宮 36
第三節 小鼠平衡功能實驗 39
第四節 抑鬱模型的建立和評定 40
一、抑鬱症的模型製作 41
二、抑鬱動物的行為學評價 45
第五節 嗅覺行為功能測定 47
一、埋藏食物小球實驗 48
二、嗅覺迷宮 48
第六節 大腦中動脈閉塞模型的建立和評定 49
第七節 運動功能評定 52
一、小鼠肢體力量測試實驗——小鼠抓力測試 52
二、小鼠耐力測試實驗——跑台實驗 53
第八節 感覺（痛觸覺）系統評估 54
一、Von Frey Test 54
二、智慧型熱板儀 56
三、甩尾實驗 57
第三章 神經病理學實驗 / 59
第一節 腦組織的取材、保存和標本製作 59
第二節 脊髓組織的取材、保存和標本製作 62
一、脊髓的取材和保存 62
二、 脊髓冰凍切片的製作 64
第三節 小鼠腦脊液採集 66
第四節 海馬腦片場電位的神經電生理記錄方法 67
第五節 神經免疫組織化學和免疫螢光染色 71
第六節 透視電鏡標本製作 74
第七節 老化組織相關病理特殊染色（SA-b-gal 、銀染色） 77
一、神經原纖維纏結（NFTs）染色 77
二、b-澱粉樣蛋白染色 80
三、衰老相關b-半乳糖苷酶染色 82
第八節 神經組織高爾基染色 83
第九節 神經組織體視學分析技術 86
第十節 共聚焦掃描及定量技術 92
一、雷射共聚焦顯微鏡的成像原理 92
二、雷射共聚焦顯微鏡在神經變性疾病研究中的運用 93
三、雷射共聚焦顯微鏡結構 95
四、基本掃描及圖像獲取 95
五、微分干涉差（DIC）掃描及圖像獲取 102
六、拼圖掃描及圖像獲取 103
七、Z-Stack掃描及圖像獲取 103
八、時間序列掃描 105
九、雷射共聚焦圖像定量及後處理 106
第四章 神經生化和基因檢測 / 115
第一節 轉基因動物的基因型鑑定、保種和管理 115
一、小鼠生殖生理 115
二、小鼠的生長周期 116
三、基因工程鼠飼養繁殖一般流程和注意事項 116
四、常用小鼠品系的概況 117
五、幾種常用神經變性疾病轉基因鼠的介紹和鑑定 118
第二節 神經組織蛋白檢測 125
一、蛋白質印跡法 125
二、免疫共沉澱原理及步驟 130
三、動物腦組織勻漿檢測Ab 132
第三節 RNA提取及實時螢光定量PCR技術 134
一、RNA提取 134
二、RT-PCR 135
三、qPCR 135
第四節 基因晶片檢測 140
一、單核苷酸多態性晶片實驗 140
二、基因表達譜晶片檢測 142
第五節 螢光素酶報告基因技術分析啟動子轉錄活性 143
第六節 螢光定量PCR法檢測端粒酶活性 146
第七節 中樞神經系統突觸和非突觸線粒體的分離提取 148
第五章 分子影像技術檢測神經變性疾病 / 157
第一節 PET/SPECT-CT顯像探針的製備 158
第二節 fMRI成像技術的原理及其實驗設計與數據處理 164
一、fMRI實驗設計 164
二、實驗設備 166
三、實驗數據處理 166
四、fMRI實驗相關的準備 169
五、小結 170
第六章 神經變性疾病患者臨床神經評估、樣本保存和資料庫建設 / 171
第一節 神經變性疾病臨床登記和資料庫建立和實施 171
一、臨床研究目標的確立 171
二、研究方案的確立 172
三、組織機構的建立 173
四、病例報告表（CRF）的建立 174
第二節 神經變性疾病患者血液、腦脊液組織樣本的保存和處理 177
一、血液及血液成分的處理和保存 178
二、腦脊液的處理和保存 179
三、標本DNA的提取和保存 180
附表6-1 標本保存詳細記錄 180
附表6-2 關於使用組織樣本開展科學研究的知情同意書 181
第三節 神經心理認知障礙測試診斷系統 182
一、醫生端系統 182
二、用戶管理 183
三、臨床病例登記 183
四、案例管理 186
五、統計列印 190
六、量表管理 191
第七章 神經生物學常用分析及作圖軟體的套用 / 193
第一節 Image J神經生物分析軟體的套用 193
一、 Image J神經生物分析軟體的基本功能 193
二、 Image J神經生物分析軟體分析免疫螢光定量技術 197
第二節 Graphpad Prism 6.0作圖和統計套用 205
一、折線圖 205
二、直條圖 208
三、生存曲線圖 216
四、散點圖 219
五、餅圖 225
第三節 Logistic回歸、Cox風險模型以及Kaplan-Meier曲線的統計套用 231
一、Logistic回歸分析和ROC工作曲線的制訂 231
二、 Cox回歸分析 238
三、Kaplan-Meier曲線分析 242
第四節 EndNote×7的套用 245
一、文獻管理 245
二、論文撰寫 245
