宮內營養不良胎鼠胰島ε細胞分化及其調控機制

《宮內營養不良胎鼠胰島ε細胞分化及其調控機制》是依託浙江大學，由王秀敏擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：宮內營養不良胎鼠胰島ε細胞分化及其調控機制
• 依託單位：浙江大學
• 項目負責人：王秀敏
• 項目類別：面上項目

項目摘要

目前已證實宮內營養不良與成人期疾病如糖尿病、代謝綜合徵(MS)之間的相關性，但其病理生理機制尚待明確。ghrelin影響血糖、胰島素水平，且與胰島素抵抗密切相關。本研究組已發現宮內營養不良影響新生大鼠胰島素分泌，導致胰島ghrelin表達和ghrelin陽性細胞變化；且這種改變在生後持續存在。在前期工作基礎上，本研究擬通過建立宮內營養不良模型，聯用免疫螢光、雷射共聚焦、原位雜交、細胞分選和表觀遺傳學技術等檢測調控胰島內分泌細胞分化的胚胎早、中、晚期轉錄因子Ptf1a、Ngn3、Pdx1、Pax4、Pax6、Nkx2.2在胰腺的表達和定位；明確宮內營養不良狀態下上述轉錄因子對ε細胞分化的影響及其部分表觀遺傳學機制，進一步探索ε細胞與β細胞之間的相互作用。通過分離胰島培養探討宮內營養不良對胰島分泌胰島素和ghrelin功能的作用，從而探尋宮內營養不良對成人期糖尿病和 MS的程式化影響的機制。

結題摘要

1. 課題組完成了構建發育過程中宮內營養不良胎鼠和宮內發育遲緩（intrauterine growth restriction IUGR）新生大鼠模型，並探究了宮內營養不良對ghrelin及胰島素表達的影響。 2. 課題組檢測宮內營養不良大鼠胰島特異性轉錄因子Pdx1和胰島素表達，發現宮內營養不良組新生鼠和生後21天大鼠Pdx1和胰島素均顯著低於對照組，且Pdx1表達和胰島素表達有相關性，提示宮內營養不良可能通過調控Pdx1水平影響胰島素表達。 3. 課題組探索了宮內營養不良狀態下表觀遺傳學機制對ε細胞分化的影響。發現Pdx1、Ptf1a表達影響ε細胞分化；顯示H3K4m3乙醯化修飾調控Pt1fa和PAX4基因的表達；蛋白乙醯化的改變參與了宮內生長遲緩大鼠胰腺的分化的過程，且這種過程可能通過調控胰腺發育相關的轉錄因子Pax4和Nkx2.2的表達來進行。 4. 課題組比原定計畫增加了高脂飲食對IUGR發育雌性大鼠CYP3A表達和活性的影響的研究。課題組發現，IGUR狀態下CYP3A酶活性的差異主要表現在生後的早期，在7天及以後的幾個發育階段，與正常狀態相比，IGUR大鼠體重始終低於正常出生體重大鼠，但兩組之間酶活性未發現有顯著差異。在本研究基礎上，課題組進一步開展了高脂高能飲食下IUGR大鼠CYP3A表達的影響，並且發現了很有意義的研究結果。 5. 課題組未能完成Ngn3及Pax6表達和定位的研究：由於模型大滑鼠本發育早期的標本有限、而且課題組搜尋多家國內外試劑公司，反覆試驗發現Pax6等抗體不穩定，結果可靠待定。 6. 在本課題的資助下，發表SCI論文3篇，綜述3篇。另有1篇SCI綜述已經接受；培養研究生2名；參加了國際會議並得到專業培訓一次。