《套用TALEN技術研究LSD1在造血分化中對GATA switch的調控機制》是依託吉林大學，由胡鑫擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：套用TALEN技術研究LSD1在造血分化中對GATA switch的調控機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：胡鑫
- 依託單位：吉林大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
LSD1是第一個組蛋白去甲基化酶，本研究擬套用TALEN靶向基因操作技術對基因組進行定點改造，構建LSD1缺失細胞，探究LSD1在造血分化中對GATA Switch的調控機制。GATA2主要在造血乾/祖細胞的增殖和分化中發揮作用，並隨造血細胞分化表達下調，而GATA1表達上調，進而調控造血細胞的增殖與分化（GATA Switch）。項目擬通過ChIP-seq、GST-pull down和IP等技術揭示在造血早期GATA2募集LSD1至GATA1位點，抑制GATA1表達，但隨造血分化TAL1與GATA1結合，招募LSD1至GATA2 位點，進而抑制GATA2表達；並在TALEN技術構建的LSD1缺失細胞中通過RT-qPCR及ChIP分析GATA轉錄因子表達及組蛋白甲基化水平的變化，明確LSD1對GATA Switch的調控機制，從而建立套用TALEN技術研究LSD1調控造血分化機制的新模型。
結題摘要
GATA2轉錄因子主要表達於造血幹細胞和祖細胞（HS/pc），並協同特定轉錄因子GATA1調節造血細胞的增殖與分化。然而GATA轉錄因子如何協同組蛋白去甲基化酶LSD1調控造血細胞分化的機制尚不明確。本研究表明，沉默的LSD1會增加GATA2表達並抑制小鼠紅系白血病細胞MEL和胚胎幹細胞分化。此外，造血分化早期GATA2募集LSD1至GATA1基因的dbG、IE位點，通過LSD1去甲基化功能抑制GATA1表達；隨造血細胞分化，GATA2和LSD1相互結合減弱，TAL1和LSD1相互結合增強，TAL1將LSD1招募至GATA2基因的1S啟動子位點，進而抑制GATA2表達，促進紅細胞分化。LSD1通過調節GATA1、GATA2蛋白表達對造血系統分化發揮重要調控功能，LSD1、TAL1、GATA2以複合體形式動態調控這一過程。本研究從一個全新的組蛋白修飾的角度闡釋了GATA Switch的調控機制，明確了LSD1所介導的表觀遺傳學修飾對GATA Switch的調控功能，從而建立了LSD1調控造血分化機制的新模型。
