《天然抗氧化肽對腸肽酶的耐受性及其跨膜轉運機制》是依託中國農業大學，由李博擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：天然抗氧化肽對腸肽酶的耐受性及其跨膜轉運機制
- 依託單位：中國農業大學
- 項目負責人：李博
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
活性肽潛在的生理功效在於經過口服後能否到達靶器官。小腸上皮細胞吸收屏障及其酶系統是活性肽口服進入機體的關鍵障礙所在。本研究以抗氧化肽為研究對象，以酪蛋白為原料酶法製備多肽混合物，採用色譜技術分離出高活性組分；採用胃液-腸液- Caco-2 細胞的三段式模型模擬體外連續消化吸收。著重研究抗氧化肽在小腸上皮細胞的代謝和吸收規律；研究分子量、荷電性和疏水性等結構性質與肽的耐消化性及其跨膜轉運路徑之間的內在聯繫。通過質譜圖比對識別並鑑定完整轉運的抗消化肽，研究抗消化肽的結構特徵，進一步鑑定高活性抗消化肽。本課題創新地運用組學的研究方法，通過組群指標分析，揭示抗氧化肽的降解和跨膜轉運機制及其影響因素，闡明口服抗氧化肽的生物可達性以及抗消化肽的結構特徵。該研究有助於人們了解生物活性肽以及影響活性肽的生物利用度和吸收的因素，豐富寡肽吸收理論，並為生產具有真正功效的抗氧化肽功能食品提供理論依據。
結題摘要
活性肽潛在的生理功效在於口服後能否到達靶器官。小腸上皮細胞吸收屏障及其酶系統是活性肽口服進入機體的關鍵障礙。系統地研究活性肽的結構性質與肽轉運路徑的關聯性以及對腸肽酶耐受性，可深入理解生物活性肽的跨膜轉運和消化吸收機制。本項目著重研究抗氧化肽在小腸上皮細胞的代謝和吸收規律，研究分子量、荷電性和疏水性等結構性質與肽的耐消化性及其跨膜轉運路徑之間的內在聯繫以及抗消化肽的結構特徵。研究結果表明：1、肽組分的生物利用度在4%-16%之間，肽的分子量、電荷性和疏水性對其生物利用度有較大影響。帶有負電荷性，弱疏水性時，肽組分的吸收率和吸收物的抗氧化活性保留率較高，具有優異的生物利用度；2、當分子量＜500 Da時，肽組分主要通過PepT1載體調節通路進行吸收轉運；二肽和三肽C端的帶電荷胺基酸在一定程度上會促進其吸收，在轉運過程中肽的水解基本全部來自於BBPs，其最大水解速率為11.4×10-3 mM Gly/min；3、親水性的肽段或帶有較多的負電荷（≥2），通過細胞旁路進行吸收。在細胞旁路中，水解活性肽的酶主要為BBPs，最大水解速率為6.91×10-3 mM Gly/min；同時還有其他的肽酶參與水解，最大水解速率為5.59×10-3 mM Gly/min；4、轉胞吞作用對帶有較多正電荷（≥2）的肽段以及強疏水性的肽段具有較強的選擇性，肽的疏水性與轉胞吞作用總體上呈現正相關關係；5、不同胺基酸組成的抗氧化肽對應的胃腸消化肽對腸肽酶的耐受性不同。酸性組分的酪蛋白抗氧化肽具有較高的生物有效率；6、抗消化肽的結構特徵與組成其肽序列的胺基酸的疏水性與親水性有關。抗消化肽在胺基酸組成上具有疏水性胺基酸含量多，親水性胺基酸含量少的特點，並且在抗消化肽的肽序列中酸性胺基酸的含量比鹼性胺基酸的含量多。該研究有助於人們了解生物活性肽以及影響活性肽的生物利用度和吸收的因素，豐富寡肽吸收理論，並為生產具有真正功效的抗氧化肽功能食品提供理論依據。
