大豆在暗誘導下光周期及衰老相關基因的差異表達研究

《大豆在暗誘導下光周期及衰老相關基因的差異表達研究》是2009年5月1日中國農業科學技術出版社出版的圖書，作者是趙琳

基本介紹

• 書名：大豆在暗誘導下光周期及衰老相關基因的差異表達研究
• 頁數： 180頁
• 出版社：中國農業科學技術出版社
• 出版時間： 第1版 (2009年5月1日)

基本信息

出版社: 中國農業科學技術出版社; 第1版 (2009年5月1日)

平裝: 180頁

正文語種: 簡體中文

開本: 32

ISBN: 9787802338692, 7802338697

條形碼: 9787802338692

產品尺寸及重量: 20 x 14 x 1.2 cm ; 281 g

ASIN: B002CJ1TEI

內容簡介

《大豆在暗誘導下光周期及衰老相關基因的差異表達研究》講述了:黑龍江省是我國大豆主要生產基地，加入世貿組織後，大豆面臨嚴重的進口壓力。主要原因是我國大豆單產低，競爭力不強。大豆屬於短日照植物，其生長發育對光周期反應非常敏感，這一特性嚴重阻礙大豆品種的適應性，是制約大豆單產提高和穩產的關鍵因素。暗處理相當於短日照，可以縮短大豆的開花和成熟期，其表型之一是加速葉片的衰老。葉細胞的結構、代謝和基因表達都協調的發生變化，細胞器官的組分被依次有序的分解。代謝變化包括合成代謝活性的減弱，如光合作用和蛋白質的合成，以及分解代謝的加速，如核酸降解和蛋白水解。這些對維持植物生長和生殖是非常必要的，基因轉錄物豐度的巨大變化揭示了從有光合活性的葉片到作為流動營養物來源的衰老器官來維持發育的轉變情況。

作者簡介

趙琳(1980- )，女，黑龍江省鶴崗市人，博士，助理研究員。主要從事大豆生物技術研究，2007年至今工作於東北農業大學農學院/大豆生物學省部共建教育部重點實驗室。在利用抑制性消減雜交技術尋找差異表達基因、基因克隆、生物信息學、植物組織培養、轉基因及轉基因品種培育研究方面取得一定的成績。

目錄

1 引言

1.1 植物開花機理的研究進展

1.1.1 植物花芽分化過程的調節機制

1.1.2 環境條件對植物成花的調控

1.2 大豆光周期現象的研究進展

1.2.1 大豆生育期性狀的光周期反應特性

1.2.2 光周期對大豆農藝性狀和籽粒品質的影響

1.2.3 大豆中光敏感性E等位基因的研究進展

1.2.4 大豆開花時間基因圖譜的繪製

1.3 擬南芥開花誘導的分子生物學研究進展

1.3.1 光周期途徑

1.3.2 春化促進途徑

1.3.3 自主途徑

1.3.4 赤黴素途徑

1.3.5 染色質結構和開花抑制

1.3.6 擬南芥開花途徑的整合

1.3.7 植物中的擬南芥開花途徑的基因保守性

1.4 植物衰老的研究

1.4.1 衰老的生理生化反應特性

1.4.2 衰老學說

1.4.3 衰老的調控

1.5 RAV轉錄因子的研究進展

1.6 基因差異表達的研究方法

1.6.1 基於cDNA的PCR擴增方法

1.6.2 基於差減雜交的克隆方法

1.6.3 表達序列標籤

1.6.4 基因表達系列分析

1.6.5 微陣列雜交

1.6.6 實時螢光定量PCR技術

1.7 植物遺傳轉化

1.7.1 植物遺傳轉化方法

1.8 研究目的和意義

2 材料和方法

2.1 實驗材料和試劑

2.1.1 植物材料

2.1.2 菌種及載體

2.1.3 主要試劑

2.2實驗方法

2.2.1 抑制性消減雜交(SSH)

2.2.2 抑制消減文庫的構建

2.2.3 反向Northem blot斑點雜交篩選消減文庫

2.2.4 測序及序列同源性檢索

2.2.5 實時螢光定量PCR進一步驗證差異表達的片段

2.2.6 RACE方法克隆大豆GmRAV基因

2.2.7 Real-time RT-PCR分析GmRAV的表達

2.2.8 植物表達載體pBI121-GmRAV的構建

2.2.9 農桿菌介導法轉化菸草葉盤

2.2.10 轉基因菸草的分子生物學檢測

2.2.11 轉GmRAV基因菸草T2代功能分析

3 結果與分析

3.1 抑制性消減雜交(SSH)

3.1.1 大豆總RNA的提取

3.1.2 SMART技術合成cDNA

3.1.3 雙鏈cDNA的Rsal酶切結果

3.1.4 正向差減產物的PCR擴增結果

3.1.5 反向Northern斑點雜交篩選結果

3.1.6 測序與同源性檢索結果

3.1.7 候選cDNA片段差異表達檢測分析結果

3.1.8 基因功能相關分析

3.2 大豆GmRAV基因克隆

3.2.1 大豆GmRAV基因5'RACE和3'RACE克隆

3.2.2 大豆GmRAV基因全長序列的生物信息學及系統進化分析

3.2.3 GmRAV全長基因組DNA序列的獲得

3.3 大豆GmRAV基因表達研究

3.3.1 大豆葉片中GmRAV基因在LD和SD條件下基因表達

3.3.2 大豆GmRAV基因在LD和SD條件下組織特異性表達分析

3.3.3 激素對大豆葉片中GmRAV基因的表達影響

3.4 植物表達載體pBI121-GmRAV的構建

3.5 菸草的遺傳轉化

3.5.1 叢生芽和根的誘導

3.5.2 轉基因菸草的PCR檢測

3.5.3 轉基因菸草的PCR-Southem檢測

3.5.4 轉基因菸草的Nortthem blot檢測

3.5.5 長日照和短日照下轉基因菸草的T2代表型觀察

3.5.6 轉GmRAV基因菸草植株矮化與BR和GA激素有關

3.5.7 過量表達GmRAV增強了ABA促進葉片衰老的效應

3.5.8 暗處理下GmRAV過量表達加速植株的衰老

4 討論

4.1 光周期和衰老相關基因表達譜分析

4.2 光周期和衰老相關基因的克隆

4.3 植物表達載體的構建及菸草的遺傳轉化

4.3.1 採用農桿菌轉化植物的優勢

4.3.2 轉化農桿菌及其鑑定

4.3.3 用於轉化的農桿菌的培養

4.3.4 葉盤法轉化菸草

5 結論

參考文獻

附錄

攻讀學位期間發表的學術論文

圖版