《多靶點抑制X區、PreS1和NTCP基因後對HBV感染和清除的影響》是依託中南大學，由馬靜擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：多靶點抑制X區、PreS1和NTCP基因後對HBV感染和清除的影響
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：馬靜
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
抗病毒治療是慢性B型肝炎（CHB）治療的首選，但對大多數CHB患者而言，抗病毒藥物不可能清除HBV，因此CHB根治成為奢望。而清除宿主細胞核內HBV共價閉合環狀DNA（cccDNA）是治癒CHB關鍵。HBV X基因有反式激活作用，可促進HBV複製。PreS1 N端胺基酸與肝細胞表面鈉離子--牛磺膽酸共轉運蛋白（NTCP）受體特異性結合，是HBV進入細胞的關鍵。我們發現CRISPR/Cas系統靶向X區，有降低細胞核內cccDNA、抑制HBV複製及HBsAg和HBeAg表達的作用。我們的研究將涵蓋PreS1區、X區和NTCP基因的69個靶點，觀察CRISPR/Cas系統聯合切割S區、X區和NTCP基因的單一或多個靶點後，能否最大程度的減少HBV進入細胞以及降解細胞核內cccDNA，為抗病毒治療提供新思路。
結題摘要
B型肝炎病毒（HBV）感染是世界公共衛生的主要問題，抗病毒治療可以是臨床醫生的治療慢性B型肝炎（CHB）患者的首選方案，但口服抗病毒藥物不能被完全清除體內的HBV。HBV的基因組 cccDNA的X基因反式激活作用促進病毒的複製；PreS1 N端胺基酸與人肝細胞表面特異性受體鈉離子-牛磺膽酸共轉運蛋白（NTCP）結合，與HBV進入宿主細胞有關。我們前期研究發現CRISPR/Cas系統作用於X區部分靶點後對HBV病毒複製和cccDNA、HBsAg、HBeAg均有不同程度的影響。我們利用CRISPR/Cas9系統將S區和X區31個靶點均將納入研究，結果發現靶點X2和S6對HbsAg和HbeAg有明顯下調作用；C1、P1和V7對HbeAg有明顯下調作用；S12對HBV DNA 合成有抑制作用；SP3、SP4、S10、S14、V7和X2 對HBV基因組S區、X區和C區有明顯下調作用，其中SP3、SP4、S10、S14和X2 五個靶點由於V7靶點；SP3，SP4和V7靶點對HBV表達相關蛋白有下調作用，為抗病毒提供新思路及方向。
