多功能酶標儀又稱多功能微孔板檢測儀（機）或多功能微孔板檢測平台，可對以微孔板為體系的實驗提供多種不同模式的檢測。通常，多功能酶標儀是指具有兩種及以更多檢測功能的儀器，通常情況下至少可提供“吸收光”、“螢光”這兩種最常見檢測功能。而一些中端至高端多功能酶標儀還可支持“化學發光” 、“生物發光共振能量轉移” 、“時間分辨螢光”、“螢光偏振” 、甚至還可以支持“Western Blot”和“上轉換髮光”等高級檢測實驗。
基本介紹
- 中文名：多功能酶標儀
- 外文名：Multifunctional enzyme marker
- 又稱：多功能微孔板檢測儀
- 特點：光柵和濾光片技術
- 實驗：光吸收、螢光、化學發光等
簡介,分類,按照功能的劃分,基於濾光方式的不同分類,特點,相關參數,適用範圍,操作方法,用途,
簡介
多功能酶標儀指擁有多種檢測模式的單體台式酶標儀。通常某些多用途高端型酶標儀支持標準1cm立式比色皿插槽，不僅僅微孔板可進行吸光度（Abs)、螢光強度(FI)、時間分辨螢光（TRF)、螢光偏振（FP)、和化學發光（Lum)檢測，甚至1cm立式比色皿也可進行除吸光度檢測外的螢光強度和化學發光檢測。
分類
酶標儀是實驗室常用的一種儀器，一般可以按照濾光方式的不同和功能的不同進行劃分。
按照功能的劃分
酶標儀可以分為光吸收酶標儀，螢光酶標儀，化學發光酶標儀和多功能的酶標儀。
光吸收酶標儀是用來進行可見光與紫外光吸光度的檢測。特定波長的光通過微孔板中的樣品後,光能量被吸收，而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關係，由此可以用來定性和定量的檢測。光吸收的檢測技術成熟，成本低，操作簡單，但是動態範圍窄，靈敏度比較低，特異性不強.一般可見光和紫外光分別採用鎢燈及氘燈作為光源，而紫外/可見酶標儀是可以將兩種光源進行切換，適應不同測量波長的需求。
光吸收酶標儀是用來進行可見光與紫外光吸光度的檢測。特定波長的光通過微孔板中的樣品後,光能量被吸收，而被吸收的光能量與樣品的濃度呈一定的比例關係，由此可以用來定性和定量的檢測。光吸收的檢測技術成熟，成本低，操作簡單，但是動態範圍窄，靈敏度比較低，特異性不強.一般可見光和紫外光分別採用鎢燈及氘燈作為光源，而紫外/可見酶標儀是可以將兩種光源進行切換，適應不同測量波長的需求。
螢光酶標儀是用來進行螢光的檢測.通過激發光柵分光後的特定波長的光照射到被螢光物質標定的樣品上後，會發出波長更長的發射光，通過發射光柵後到達檢測器。螢光的強度與樣品的濃度呈一定的比例。螢光檢測靈敏度高,可實時檢測，使用方便,檢測模式多樣，但是容易受外界干擾，激發光與發射光容易互相影響，干擾檢測。
化學發光是來自生物化學反應中的自發光，可分為輝光型和閃光型兩種類型。輝光型發光持久，穩定，能持續一段時間；閃光型發光時間短，變化快，穩定性不強，需要套用自動加樣器才可以進行。化學發光中發出的光子數與樣品量呈一定比例關係，化學發光酶標儀靈敏度非常高，動力學範圍廣。
多功能酶標儀是以上三種酶標儀的集合,集成了兩種或者三種酶標儀於一體，可以同時進行光吸收，螢光和化學發光的檢測，功能強大，使用範圍廣，可作為研究平台,避免了重複購買，是實驗室的首選。
化學發光是來自生物化學反應中的自發光，可分為輝光型和閃光型兩種類型。輝光型發光持久，穩定，能持續一段時間；閃光型發光時間短，變化快，穩定性不強，需要套用自動加樣器才可以進行。化學發光中發出的光子數與樣品量呈一定比例關係，化學發光酶標儀靈敏度非常高，動力學範圍廣。
多功能酶標儀是以上三種酶標儀的集合,集成了兩種或者三種酶標儀於一體，可以同時進行光吸收，螢光和化學發光的檢測，功能強大，使用範圍廣，可作為研究平台,避免了重複購買，是實驗室的首選。
基於濾光方式的不同分類
酶標儀基於濾光方式的不同可分為濾光片式的酶標儀和光柵式酶標儀。濾光片式酶標儀採用濾光片來進行波長的選擇，酶標儀內置濾光片輪，可選擇試驗所需的不同波長的濾光片來進行分光，光源發出的全波譜光經過濾光片後，大部分被過濾，只剩下濾光片本身允許的波長通過，這樣就可就通過濾光片來獲得特定的波長。濾光片輪一般包含4-6塊濾光片，通過選擇不同的濾光片可獲得不同的波長，但是獲得的波長都是固定的，受到一定的限制，不能獲得任意所需的波長，而且更換濾光片價格比較昂貴。一般波長固定的濾光片有405，450，490，630nm。
光柵式酶標儀雖然才出現短短十餘年，但是發展非常迅猛，已經是主流的酶標儀.它採用光柵進行分光，光源發出的全波譜光線經過光柵後，通過光柵上面分布的一系列狹縫的分光，就可以獲得任意波長的光，波長連續可調，一般遞增量為1nm，同時具有頻寬可選的功能。光柵式酶標儀使用方便靈活，可以通過軟體選擇任意波長的光，而且可以進行全波長的掃描,通過全波長掃描可以獲得未知樣品的吸收峰，從而可以達到檢測未知樣品的目的，在實驗室中很受歡迎，可以進行更多實驗的檢測，因此在國內的普及程度很高。
另外根據通道的個數，可以將酶標儀分為單通道和多通道兩種類型，單通道又有自動和手動兩種之分。
另外根據通道的個數，可以將酶標儀分為單通道和多通道兩種類型，單通道又有自動和手動兩種之分。
特點
1、光柵和濾光片技術：:基於濾光片系統的高靈敏度檢測和基於光柵系統的高靈活度檢測。
2、檢測模式：螢光強度檢測(FI)，螢光偏振檢測(FP)，時間分辨螢光檢測(TRF)，TR-FRET，高性能發光檢測, 紫外/可見吸收光，AlphaScreen / AlphaLISA，Western Blot等。
3、兼容微量檢測板：可進行體積為2 μL或4μL，最大可支持 60多個微量樣品的同時檢測。
4、光柵型單色器系統及頻寬可調：光路整合了光柵單色器， 這種光柵設計可實現波長連續可調節。然而，加入可變頻寬設計極大的增加了檢測的靈活性。
5、可結合濾光片系統：濾光片極大提升多種檢測功能的靈敏度。
相關參數
1、光密度測讀模式：1）波長範圍：230~1000nm，精確選擇波長1nm。
2）頻寬：4 nm。
3）波長準確度：±2.0nm。
4）波長重現性：±1.0nm。
5）測讀範圍：0~4.0 OD。
6）光分辨度：0.001 OD。
7）測讀準確度(微孔板)：< ±0.010 OD ±1.0%
8）(比色杯)：< ±0.010 OD ±1.0%
9）測讀精確度：< ±0.003 OD ±1.0%
10）雜散光：0.05% @ 230 nm。
11）微孔板測讀時間：96: 18 秒384: 49 秒。
12）溫度範圍：室溫+4~45度。
2、時間分辨螢光法（TRF）
1）波長範圍 濾光片: 波長可隨意定製，光柵: 250 - 850 nm，步進1nm。
2）數據採集可調
3）測讀次數：1~100flashes，
4）測讀延遲：0~600usec。
5）讀取數據積分時間：50~1500usec。
6）頻寬：9nm, 15nm，25nm
8）靈敏度：10fM/孔 銪元素（96孔頂讀模式）。
9）讀取速度：96孔板17秒，384孔48秒。
3、螢光偏振（FL）
1）波長選擇方式：光柵全波長（頂部）或深部阻擋濾光片（頂部）。
2) 波長範圍：300 - 750 nm。
3）檢測靈敏度：3nM螢光素/孔時，<5mp SD。
4）讀取速度：96孔板42秒，384孔123秒。
4、化學發光模式（Lum）
1）連續波長範圍300~850nm。
2）靈敏度：8amol ATP（384孔頂讀模式）。
3）讀取速度：96孔板120秒，384孔420秒。
4）光交叉<0.4%。
適用範圍
1、DNA/RNA/蛋白質測試及定量。
2、所有微孔板的ELISAs、酶動力學，測試藥物解離代謝測試。
3、細胞毒及細胞發育、死亡測試。
4、Caspase-3 以及蛋白酶測試。
5、cAMP的結合位點測試。
6、IMAP激酶測試（激酶藥物篩選）。
7、Intrinsic tryptophan螢光測試。
8、綠色螢光蛋白的測試。
9、FRET（螢光能量轉移） and TR-FRET（時間分辨的螢光能量轉移，針對快釋放性小含量受體的檢測） 測試。
10、HTRF 測試 (M5e only)。
11、ADME-Tox（藥物吸收，分布，代謝和排泄和毒性陣列）測試。
12、親油性基團測試。
13、人血球蛋白結合測試。
14、膜滲透測試(PAMPA平行人造膜透性組合)。
15、溶解度測試。
16、體外細胞侵襲培養系統測試。
17、Delfia（分布鑭系螢光免疫分析）測試。
操作方法
首先將抗原(或抗體)物質吸附(醫學上稱“包被”)在樣品盤中(國際上通用的樣品盤是96 標準微孔反應板)；再將待測樣品(如血液、體液等)加入樣品盤；於是待測未知的抗體(或抗原)與包被的抗原(或抗體)相結合，成為抗體抗原複合物。
當依次加入酶結合物(即酶標記抗體或酶標記抗原)和酶的底物時便產生呈色反應，呈色程度與被檢測樣品中待測抗體(或抗原)的量相關，據此就可以得出定性或定量的檢測結果。
用途
酶標儀是一種用途廣泛的生物檢驗醫療設備，利用酶聯免疫分析法,根據酶標記原理，根據呈色物的有、無和呈色深淺進行定性或定量分析。這是一種極具生命力的免疫學技術。可用於單克隆抗體篩分、凝血分、抗生素靈敏度檢驗，以及其它需要進行比色的分析工作中。該儀器適用於臨床檢驗、微生物學、流行病學、免疫學、內分泌學以及農林科學等領域。廣泛用於醫院、血站、防疫站、生物製品等部門。
我國衛生行政主管部門已明確規定,對多發常見的肝炎病診斷，不能用目測進行，必須用酶標儀判斷。沒有酶標儀或不用酶標儀的醫院不能上等級，也沒有判斷肝炎的資格和權利。對於有蔓延趨勢的愛滋病毒的判斷，必須建立專門的愛滋病實驗室並採用酶標儀進行判斷。
