增齡性胸腺萎縮過程中FoxN1的分子作用機制

《增齡性胸腺萎縮過程中FoxN1的分子作用機制》是依託吉林大學，由孫麗光擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：增齡性胸腺萎縮過程中FoxN1的分子作用機制
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：孫麗光
• 依託單位：吉林大學

項目摘要

胸腺是T淋巴細胞發育場所，是最早衰老的器官。至青春期，人體的胸腺功能已喪失過半，以萎縮為主要特徵，稱為增齡性胸腺萎縮，導致初始T細胞的輸出減少，免疫功能減低，使老年人罹患感染、癌症及自身免疫性疾病的機率上升。FoxN1是胸腺上皮細胞發育的必需基因，在人類和小鼠，先天性FoxN1基因變異可導致無胸腺發育和無毛髮生長。FoxN1對胸腺發育的作用不僅限於胚胎期，在出生後胸腺功能維持中，FoxN1仍發揮著不可替代的作用，但其分子作用機制卻鮮有報導。本項目中，我們根據已有的實驗結果，推測Notch信號通路中的受體DLL4是FoxN1的下游分子，並擬通過在胸腺不同發育階段及不同基因鼠中行Q-PCR檢測FoxN1和DLL4的mRNA水平、體內外轉染FoxN1檢測DLL4的變化和ChIP實驗檢測FoxN1與DLL4結合與否來驗證這一假說，以期為防治免疫衰老相關的疾病及提高腫瘤患者的存活率提供實驗依據。

結題摘要

胸腺是T淋巴細胞發育場所，是最早衰老的器官。至青春期，人體的胸腺功能已喪失過半，以萎縮為主要特徵，稱為增齡性胸腺萎縮，導致初始T細胞的輸出減少，免疫功能減低，使老年人罹患感染、癌症及自身免疫性疾病的機率上升。FoxN1是胸腺上皮細胞發育的必需基因，在人類和小鼠，先天性FoxN1基因變異可導致無胸腺發育和無毛髮生長。FoxN1對胸腺發育的作用不僅限於胚胎期，在出生後胸腺功能維持中，FoxN1仍發揮著不可替代的作用，但其分子作用機制卻鮮有報導。本項目中，我們根據已有的實驗結果，推測Notch信號通路中的受體DLL4是FoxN1的下游分子，並擬通過在胸腺不同發育階段及不同基因鼠中行Q-PCR檢測FoxN1和DLL4的mRNA水平、體內外轉染FoxN1檢測DLL4的變化和ChIP實驗檢測FoxN1與DLL4結合與否來驗證這一假說，以期為防治免疫衰老相關的疾病及提高腫瘤患者的存活率提供實驗依據。胸腺上皮細胞（Thymic Epithelial Cell, TEC）的分離與純化一直是較難解決的問題，在項目執行期間，我們最佳化了小鼠TEC的分離方法（投稿核心期刊1篇，已被接收），這將為TEC的系統研究提供了方法學基礎；我們利用實時螢光定量PCR方法檢測了TECs中FoxN1和DLL1的表達結果，初步發現二者呈現正相關，可為胸腺增齡性衰老的信號通路的研究提供可行性依據；但是本項目因Chip實驗的陰性表達，沒有得到肯定的Foxn1蛋白與Delta like 4蛋白之間相互作用的結論，故而未達到預期目的，其原因可能與Foxn1蛋白抗體的效價低有關，目前只有兩家公司出售該抗體，但結果均不顯著。為了彌補項目中的不足之處，我們在結題前半年設計了通過構建人源化小鼠的胸腺衰老模型以檢測人的胸腺的衰老機制，現已經得到一些初步結果，並且我們還會利用單位提供的基本業務經費繼續補充完善本項目的科學研究，希望能為防治免疫衰老相關的疾病及提高腫瘤患者的存活率提供實驗依據。