《增生性玻璃體視網膜病變血清分子標誌物的驗證》是依託同濟大學，由於靖擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：增生性玻璃體視網膜病變血清分子標誌物的驗證
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：于靖
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
增生性玻璃體視網膜病變（proliferative vitreoretinopathy,PVR）是導致視網膜脫離手術失敗的主要原因。PVR發生髮展機理複雜，臨床上缺少客觀的評價指標。玻璃體的蛋白質異常表達貫穿在整個PVR病程。以往研究由於技術的限制，不能全面地了解PVR的玻璃體蛋白質變化。本課題組前期研究，套用二維液相色譜聯合質譜分析，鑑定出PVR的玻璃體特異蛋白質，篩選出在PVR患者的玻璃體和血清中同步出現、並與PVR嚴重程度相關的候選分子標誌物。本研究將分別從臨床血清樣本、PVR動物模型和視網膜色素上皮細胞分子水平三個方面對候選分子標誌物在臨床上評價PVR嚴重程度的敏感性和特異性、對PVR發生過程的貢獻以及由何種細胞分泌等問題進行分析判斷。本研究的完成將對PVR的分級有一個全新的量化的概念，對PVR的治療方式選擇和預後評價有積極作用，並為臨床上PVR的藥物干預開闢了一條新路。
結題摘要
增生性玻璃體視網膜病變（proliferative vitreoretinopathy，PVR）是導致視網膜脫離手術失敗的主要原因。PVR發病機理複雜，臨床上缺少客觀的評價指標。玻璃體的蛋白質異常表達貫穿在整個PVR病程。本課題組通過二維液相色譜聯合質譜分析，鑑定出PVR的玻璃體特異蛋白質，篩選出在PVR患者的玻璃體和血清中同步出現、並與PVR嚴重程度相關的候選分子標誌物：激肽原1 和胰島素樣生長因子結合蛋白6（IGFBP-6）。本研究對這2個候選的分子標註物進行了臨床血清樣本的驗證，結果證實這兩個蛋白質的血清濃度與PVR的嚴重程度成正相關，ROC曲線分析顯示當激肽原1高於441.75 ng/ml, IGFBP-6高於181.4pg/ml可以預測為嚴重PVR；當激肽原1高於88.5 pg/ml和IGFBP-6高於98.5pg/ml可以預測為預後較差。我們又對2個蛋白質參與PVR的貢獻進行了研究。採用大鼠玻璃體腔內注入RPE細胞懸液4 μL(2.5×108 /ml)和富含血小板的血漿6 μL(2.5×108 /ml)建立大鼠PVR模型，建模成功率為89.3%。Western blot分析顯示激肽原1 和IGFBP-6在PVR組中的表達明顯高於對照組（P＜0.05）。ELISA結果顯示，IGFBP-6在PVR大鼠血清、玻璃體、視網膜的平均濃度高於對照組。Real-Time PCR法檢測PVR大鼠的視網膜組織中IGFBP-6mRNA的表達量下降，肝臟中表達不增加。IGFBP-6對ARPE-19細胞的體外研究顯示，IGF-Ⅱ可以促進ARPE-19細胞增殖，IGFBP-6干預後，可以抑制IGF-Ⅱ可以促進ARPE-19細胞增殖，而對VEGF、PDGF、TGF-β誘導的ARPE-19細胞增殖沒有明顯的抑制作用。採用細胞劃痕實驗法檢測對細胞遷移的影響，結果顯示IGF-Ⅱ可以促進RPE細胞移行，IGFBP-6干預後，可以抑制 IGF-Ⅱ誘導的RPE細胞的遷移。本研究的完成對PVR的分級有一個全新的量化的概念，對PVR的治療方式選擇和預後評價有積極作用，並為臨床上PVR的藥物干預提供了新的靶點。
