《基於p-SILCA技術研究miR-21和腎臟纖維化之間的關係》是依託南昌大學，由劉秀娟擔任項目負責人的地區科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：基於p-SILCA技術研究miR-21和腎臟纖維化之間的關係
- 項目類別：地區科學基金項目
- 項目負責人：劉秀娟
- 依託單位：南昌大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腎臟進行性慢性纖維化（硬化）過程是CKD進展的共同途徑，延緩和防止腎臟纖維化是防治CKD進展的關鍵。最新研究發現TGF-β通過Smad3蛋白上調miR-21，減少細胞凋亡、增加膠原和纖連蛋白表達，引起腎臟纖維化；靶定miR-21治療腎纖維化有效。但miR-21導致纖維化所涉及到下游靶基因和信號通路尚不十分清楚。纖維化是一個非常複雜的過程，單獨地研究miR的某個靶基因有很大的局限性。本課題擬用miR-21成熟序列轉染大鼠腎小管上皮細胞，採用p-SILAC技術和生物信息學方法，篩選和鑑定miR-21下游引起腎臟纖維化的關鍵靶基因，並利用慢病毒載體RNAi技術抑制篩選到的下游靶基因，在細胞水平和動物水平進行功能驗證。本研究旨在探討miR-21引起腎臟纖維化的分子機制，尋找其介導的新的未知下游靶基因，為腎臟纖維化的靶向治療提供理論基礎。
結題摘要
背景： 腎臟進行性慢性纖維化（硬化）過程是CKD進展的共同途徑，延緩和防止腎臟纖維化是防治CKD進展的關鍵。上調miR-21引起腎臟纖維化，靶定miR-21治療腎纖維化有效。但miR-21導致纖維化所涉及到下游靶基因和信號通路尚不清楚。單獨地研究miR的某個靶基因有很大的局限性。 主要研究內容： 本課題篩選和鑑定了miR-21下游引起腎臟纖維化的關鍵靶基因，並利用相關技術調控篩選到的下游靶基因，在細胞水平和動物水平進行功能驗證。為腎臟纖維化的靶向治療提供理論基礎。 重要結果及關鍵數據： 1.miR-21上調，增加細胞凋亡，間質沉積，E-cadherin水平下降，反之亦然；DDAH1是其直接靶基因，miR-21通過抑制DDAH1表達，促進腎臟纖維化。 2.我們發現細胞自噬不足，導致凋亡增加，是腎臟急性缺血再灌注損傷的機制之一，miR-21通過其直接靶基因Rab11a，影響細胞自噬水平，從而加重腎臟損傷。 3.TGF-β通過激活鞘氨酸激酶1（SphK1），導致S1P增加，從而使得miR-21表達增加；降低SphK1的表達， miR-21表達下降，這一效應可以被外源性增加S1P恢復；阻斷S1PR2也可以降低miR-21表達；而且， 阻斷SphK1 和S1PR2 可以明顯減輕TGF-β 引起的ECM增加，而增加miR-21的表達，ECM表達增加。 科學意義： TGF-β 介導的ECM增加，是通過SphK1/S1P和miR-21/DDAH1途徑。這為腎臟纖維化的治療提供了一個新的治療靶點。miR-21可以通過其直接靶基因Rab11a，導致急性腎損傷時細胞自噬水平下降，細胞凋亡增加。這也為急性腎損傷的治療提供了一個新的治療靶點。
