基於microRNAs鑑別同卵雙生子的法醫學探索研究

《基於microRNAs鑑別同卵雙生子的法醫學探索研究》是依託華中科技大學，由黃代新擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：基於microRNAs鑑別同卵雙生子的法醫學探索研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：黃代新
• 依託單位：華中科技大學

中文摘要

基因組完全相同的同卵雙生子（monozygotic twins, MZ）個體的甑別是一個世界性難題。國內外部分學者嘗試利用表觀遺傳標記鑑別MZ個體，雖然取得了一定的進展，但仍未能徹底有效解決MZ的個體識別問題，故探尋新的MZ鑑別指標仍具有重要意義。作為近年來的研究熱點，microRNAs廣泛參與調節細胞生長發育、分化、凋亡、衰老及疾病的發生，被譽為基因表達的調節器。由此，在體內具有重要調節功能的microRNAs在MZ個體間有否表達差異是我們關注的焦點並得到預試驗的初步證實。基於此，本課題擬採用microRNA晶片全面篩選MZ個體間具有顯著表達差異的microRNAs，再套用TaqMan MicroRNA Assays技術系統定量研究其在MZ個體間的表達差異程度，旨在探討以這些差異表達的microRNAs分子作為新指標甑別MZ個體的有效性和套用價值，以期解決MZ個體鑑別這一法醫學難題。

結題摘要

基因組完全相同的MZ個體的甑別是一個世界性難題。已有學者嘗試利用表觀遺傳標記鑑別MZ個體，雖取得了一定的進展，但仍未能徹底有效解決MZ的個體識別問題，故探尋新的MZ鑑別指標仍具有重要意義。本課題旨在探索MZ個體間microRNAs表達譜差異，尋找甑別MZ個體的新指標。我們首先採用microRNA晶片對7對不同年齡和性別的MZ個體血樣的microRNAs表達譜進行了檢測分析，並採用定量PCR對差異表達的microRNAs進行了驗證。結果發現在≥4對MZ間具有共同表達差異的microRNAs 29個，從中挑選了11個採用定量PCR進行驗證，除miR-339-5p外，其餘microRNAs檢測結果與晶片結果完全一致。結合定量PCR驗證結果及microRNAs的絕對表達量，最終確定miR-142-3p、miR-4325、miR-3653-3p等20個microRNAs作為靶標記用於MZ個體的鑑別。然後採用qRT-PCR對64對MZ樣本進行上述20個靶microRNAs標記檢測，以MZ兩個體間存在≥1個microRNAs具有顯著表達差異者記為有效甑別。結果在64對MZ中，有38對可有效甑別，甑別率為59.4%。38對可甑別的MZ中，差異表達的靶microRNAs個數最少僅1個，最多的為13個，平均5.8個。所有20個靶microRNAs中，以let-7i-5p鑑別能力最強，38對可有效甑別的MZ中，有20對存在該靶標記的表達差異，miR-222-3p次之，第三為miR-151a-3p。此外，從38對MZ的靶microRNAs定量檢測結果發現存在一定的年齡相關性，即年齡越大的MZ個體間差異表達的靶microRNAs個數相對越多，年齡越小的MZ差異表達的靶microRNAs個數相對較少。本研究證實了MZ個體間存在microRNAs表達譜差異，可用作甑別MZ個體的新的生物學指標。