《基於蛋白印跡膜的水中痕量病毒快速檢測系統》是依託華中科技大學,由石雲擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名:基於蛋白印跡膜的水中痕量病毒快速檢測系統
- 項目類別:面上項目
- 項目負責人:石雲
- 依託單位:華中科技大學
- 負責人職稱:副教授
- 批准號:30771775
- 研究期限:2008-01-01 至 2010-12-31
- 申請代碼:H3001
- 支持經費:33(萬元)
中文摘要
以大腸桿菌F+RNA噬菌體為模式病毒,Qβ血清型噬菌體外殼蛋白為模板,合成蛋白分子印跡膜(蛋白MIM),結合分子生物學檢測技術,將蛋白MIM同時作為分離材料和檢測載體,建立可快速準確檢測水中痕量病毒的新方法。首先用蛋白MIM高效特異性吸附水中痕量靶病毒,然後分別建立兩種原位快速檢測方法:一是直接在MIM上依次進行病毒裂解、RT-PCR擴增,PCR擴增產物與螢光標記的血清型特異性核酸探針原位雜交,對膜上的病毒進行核酸分型和定量;二是利用螢光標記的病毒血清型抗體與膜上病毒特異性結合,直接對膜上的病毒進行抗原分型和定量。兩種方法分別平行檢測同一水樣,核酸和抗原檢測結果互為內對照,分別從核酸水平和抗原水平確定水中病毒的滴度和類型,保證了檢測的靈敏度、特異性和準確性。本研究為快速、準確檢測水中痕量病毒提供了一種新方法,在醫學、環境、農業等多個領域均有極好的套用前景,具有重要的科學、社會和經濟價值。