《基於網路篩選到的PARD6A基因團簇在卵巢癌的作用機制研究》是依託江蘇大學，由劉晗青擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：基於網路篩選到的PARD6A基因團簇在卵巢癌的作用機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：劉晗青
- 依託單位：江蘇大學
項目摘要,結題摘要,
卵巢癌是最致命的一種婦科癌症，靶向藥物的單獨用藥往往收效甚微。本項目擬用功能研究的方法—信號網路結合RNA干擾篩選的方法來鑑定腫瘤核心調控基因在卵巢癌有協同作用的新的信號中心。在我們之前的工作中已經篩選和分析出了Src作為排位第二的腫瘤核心調控基因。以臨床上有希望的Src激酶家族拮抗劑saracatinib(SAR)對候選靶向基因篩選和驗證後，不僅篩選出了EGFR等眾所周知的腫瘤靶點，證明了方法的高度有效和實用性；還篩選出了許多有潛力的卵巢癌致癌信號通路中心。我們選擇了極性蛋白基因RAPD6A團簇進行進一步的功能研究，考察它們是否和卵巢癌臨床上緊密相關、它們對卵巢癌細胞功能的影響及小鼠原位異種移植模型中與SAR聯合用藥的效果。相信用這種目前最先進的方法之一—RNA干擾，將會篩選出全新的卵巢癌信號中心，希望用以啟動新的靶向藥物和生物標記的研發，發展新的聯合用藥組合，最終改善卵巢癌的治療。
關於分割缺陷蛋白6同源物α（Partitioning defective 6 homolog alpha，PARD6A）基因的研究，目前的主要聚焦在它作為細胞極化和細胞不對稱分裂的一個重要的分子支架蛋白的作用。儘管已有少量文獻報導了該基因可能與乳腺癌及肺癌的發生髮展有關，並且多篇文獻報導，極性蛋白很有可能影響腫瘤的遷移和侵潤。但是，這個基因在卵巢癌中還未曾研究過，對這個基因在卵巢癌的作用和機制的研究，有可能定義出全新的卵巢癌靶向基因，用以啟動新的靶向藥物研究。 本項目首先考察PARD6A基因與卵巢癌的相關性，研究PARD6A基因的蛋白表達量與臨床卵巢癌腫瘤相關性；其次，通過特異性沉默或過表達PARD6A基因，檢測了該基因對卵巢癌細胞株功能的影響；此外，進一步研究了抑制PARD6A基因在小鼠卵巢癌轉移模型中的作用和機制。 研究中發現，經免疫印跡技術檢測到，PARD6A基因在漿液性卵巢癌細胞株SKOV3和A2780是異常高表達的；經免疫組織化學技術檢測到PARD6A基因的蛋白在漿液性和粘液性卵巢腫瘤臨床組織樣本中高表達（其中漿液性是卵巢癌中最常見的組織學類型），比在正常卵巢組織中的表達顯著增加。經細胞劃痕實驗、Transwell小室法、吸附實驗及免疫螢光技術等檢測到，沉默PARD6A基因，抑制了卵巢癌細胞株遷移、侵潤能力和減弱吸附能力等；同時，PARD6A過量表達促進了錨定非依賴性生長、細胞的遷移和侵潤等。經卵巢癌的小鼠肺轉移模型實驗，驗證出以小發卡RNA（short hairpin RNA，shRNA）沉默PARD6A基因，可以在小鼠體內抑制卵巢癌細胞SKOV3的轉移；對於PARD6A對卵巢癌抑制遷移和侵潤的機制，本研究檢測到PARD6A基因可能影響了Cdc42和RhoA介導的細胞遷移和侵潤相關的信號通路。 綜上所述，本研究旨在考察PARD6A基因在卵巢癌的作用和機制，希望籍此發現全新的卵巢癌靶向基因，用以改善卵巢癌的治療和預後，防止腫瘤的惡化和復發。
