基於核酸短暫雜交的基因突變檢測方法研究

《基於核酸短暫雜交的基因突變檢測方法研究》是依託北京化工大學,由蘇昕擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

  • 中文名:基於核酸短暫雜交的基因突變檢測方法研究
  • 依託單位:北京化工大學
  • 項目類別:青年科學基金項目
  • 項目負責人:蘇昕
項目摘要,結題摘要,

項目摘要

精準的基因突變檢測技術對於腫瘤早期診斷、發病機制研究以及用藥策略有著重要的意義。雜交型核酸探針被廣泛套用於已知突變位點的檢測,但是由於雜交熱力學的限制,對於單鹼基突變不敏感。核酸短暫雜交是指雙鏈核酸在其解鏈溫度附近呈現雜交與解鏈的平衡,在室溫條件下,一般雜交的雙鏈長度為9-12個鹼基。這種雜交模式突破核酸穩定雜交的熱力學瓶頸,對單鹼基變化非常敏感,在超分辨成像和生化分析領域有較好的套用前景。本課題擬利用核酸短暫雜交,通過單分子螢光和匹配動力學反應的手段,提高檢測方法對單鹼基變化的敏感度,進而實現對腫瘤患者血液樣品中的基因突變的準確檢測。

結題摘要

基因突變檢測對於腫瘤早期篩查和病理研究具有重要的意義。基於雜交型探針的方法具有快速簡便的特點,但由於選擇性差,對於單鹼基突變不敏感,在實際套用中常造成假陽性或者假陰性信號。本項目開發了基於核酸短暫雜交的方法,從原理上創新,解決了雜交型探針選擇性差的問題,同時利用單分子螢光、磁性納米粒子、選擇性核酸酶等手段提高了檢測的靈敏度,成功用於臨床血液樣品中循環腫瘤核酸中基因突變的檢測(包括肺癌和結直腸癌相關的EGFR、KRAS、BRAF等基因突變),目前正在開發相關試劑盒,有望在醫院檢驗科進行試用。在本項目的支持下,共發表高水平SCI論文14篇,申請專利5項,其中授權1項。

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