《基於抗生素親合作用的致病細菌檢測新方法》是依託西南大學,由付志鋒擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名:基於抗生素親合作用的致病細菌檢測新方法
- 項目類別:面上項目
- 項目負責人:付志鋒
- 依託單位:西南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
面對傳染病爆發、群體性食物中毒、生物恐怖攻擊等與致病細菌相關的突發公共衛生事件時,如能實現對致病細菌的快速、高效、靈敏檢測,將為疫情控制、治療方案確定和政府決策提供可靠的依據。目前已有的致病細菌檢測方法往往面臨著耗費時間長、操作步奏多、分析成本高等問題。本研究擬將作用於微生物細胞壁生物合成的抗生素作為致病細菌的分子識別試劑,利用抗生素對細菌的特異性親合作用,並結合高靈敏度的化學發光分析方法,將其用於致病細菌的檢測。研究內容具體包括:(1)採用雙位點結合模式,利用抗生素建立細菌的夾心式類免疫分析方法;(2)建立基於抗生素親合的細菌分離與富集方法,並與發光檢測聯用;(3)基於發光納米粒子粒徑對其信號的影響,建立基於細菌誘導納米糰聚的化學發光分析方法。以上思路採用價格便宜、活性穩定、質量可控的抗生素小分子作為致病細菌的識別試劑,可望建立快速、靈敏、特異、便攜、便宜的致病細菌檢測新方法。
結題摘要
在全球範圍內,致病細菌所導致的感染性疾病一直都是威脅人類健康的主要因素之一,尤其是在廣大欠已開發國家,細菌感染所導致的死亡長期高居各種死因的榜首。只有實現對這些致病細菌的快速、靈敏檢測驗證,才能為疫情控制、治療方案確定和政府決策提供及時而可靠的依據。為解決傳統細菌檢測方法耗時過長,操作過於繁瑣,難以現場化檢測等問題,本研究主要利用作用於微生物細胞壁和細胞膜的抗生素(如萬古黴素、替考拉寧、達托黴素、抗菌肽等),基於此類抗生素對細菌的特異性親合作用,並結合高靈敏度的分子發光檢測方法,將其用於致病細菌的快速檢測。代表性研究成果如下:(1)利用抗生素對細菌的親合作用,以磁珠固載化的抗生素建立了致病細菌的快速分離、富集方法,將富集的細菌裂解後,利用釋放的發光物質實現了致病菌的高靈敏檢測。(2)將抗生素標記上化學發光探針,作為信號分子使用,並與其它特異識別試劑聯合套用,建立了類似於“夾心式免疫分析”的非抗體雙位點識別分析方法,實現了致病細菌的高特異性檢測。(3)利用烈性噬菌體對宿主菌的特異性識別作用及其繁殖機制,建立了致病細菌的生物發光檢測新方法,並將其套用於細菌耐藥性檢測。以上研究所涉及的檢測對象包括金黃色葡萄球菌、變異鏈球菌、銅綠假單胞菌、蠟樣芽孢桿菌、藤黃微球菌等臨床上常見的致病細菌,其檢測時間最短可至20分鐘,檢測限最低可至3.3 CFU mL-1,並可實現高通量檢測與現場檢測。以上工作為臨床診斷、食品安全、環境衛生、生物反恐等領域提供了有力的檢測方法平台。在項目經費的資助下,以通訊作者在Anal. Chem.、Chem. Commun.、Biosens. Bioelectron.等刊物上發表SCI論文28篇;以第一完成人身份申請發明專利4項,目前已獲授權2項;以第一完成人身份獲得2018年度“重慶市自然科學獎”二等獎(公示中)。