基本介紹
內容提要,圖書目錄,圖書信息2,內容簡介,目錄,
內容提要
世界的豐富多彩是因為生命的存在,而生命誕生、發育、生長、病變、衰老乃至死亡的整個過程均由基因控制。DNA或RNA鏈上鹼基的線性排列順序編碼著生命運動的時空四維信息,甚至連高等哺乳動物和人類的思維與智商亦與基因有關。因此,目前人類正在努力實施規模宏偉的基因組研究計畫,期望由此認識生命,改造生命,最佳化生命。
圖書目錄
1 概述
1.1 基因工程的基本概念
1.2 基因工程的發展歷史
1.3 基因工程研究的意義
2 基因的表達調控原理
2.1 啟動子調控模型
2.2 操縱子調控模型
2.3 感受應答調控模型
2.4 RNA結構調控模型
2.5 RNA剪下編輯調控模型
3 DNA重組克隆的單元操作
3.1 DNA重組的載體
3.2 DNA的體外重組(切與接)
3.3 重組DNA分子的轉化與擴增(轉與增)
3.4 轉化子的篩選與重組子的鑑定(檢)
3.5 目的基因的克隆
4 大腸桿菌基因工程的原理與套用
圖書信息2
書名：基因工程概論
書號：9787302164944
作者：賀淹才
定價：45元
出版日期：2008-4-1
出版社：清華大學出版社
內容簡介
本書共分16 章，系統地闡述了基因工程的原理與技術。全書條理清晰，文筆流暢，圖文並茂，內容實用，適合作為高等院校生命科學相關專業本科生教材，也可供相關專業研究人員參考。
目錄
第一章 緒論/1
第一節 基因與基因工程的概念/1
一、基因/1
二、人類基因組計畫/5
三、基因工程的概念/6
第二節 基因工程發展史/7
第三節 基因工程的巨大意義/8
第四節 生物技術與基因工程/10
第五節 中國基因工程的現狀與前景/10
第六節 基因工程的安全性問題/13
第七節 我國的《基因工程安全管理辦法》/15
第八節 基因工程的基本過程/16
第九節 基因工程上游和下游/16
第十節 基因工程的上游工程——基因克隆/17
第十一節 基因工程的流程/17
複習思考題/18
第二章 各種工具酶/19
第一節 基因工程工具酶的概念/19
第二節 限制性內切核酸酶/20
一、寄主細胞控制的限制與修飾/20
二、限制性核酸內切酶的種類/21
三、影響限制性內切酶活性的因素/24
四、限制性內切酶命名法/24
五、限制性內切酶的作用特點與套用/25
六、DNA的限制酶分析及物理圖譜/25
第三節DNA聚合酶/27
一、大腸桿菌DNA 聚合酶I /28
二、DNA聚合酶Ⅰ大片段/30
三、大腸桿菌DNA 聚合酶Ⅱ/31
四、大腸桿菌DNA 聚合酶Ⅲ /31
五、T4-DNA 聚合酶/32
六、T7噬菌體DNA 聚合酶及測序酶/33
七、耐熱DNA 聚合酶（TaqDNA 聚合酶） /33
八、末端轉移酶/35
九、反轉錄酶/35
十、真核生物的DNA 聚合酶/37
第四節DNA連線酶/37
一、DNA 連線酶的一般性質/37
二、DNA 連線酶的作用機制/38
三、真核生物的DNA 連線酶/40
第五節S1核酸酶/40
第六節Bal31核酸酶/41
第七節 鹼性磷酸酶/41
第八節T4多聚核苷酸激酶/42
複習思考題/42
第三章 基因載體的選擇與構建/43
第一節 基因載體、報告基因與載體的致死效應/43
一、基因載體的概念/43
二、載體的報告基因（標記基因） /44
三、載體的致死效應/44
第二節 細菌質粒載體/45
一、質粒的概念/45
二、質粒的複製和遺傳/46
三、質粒的種類/46
四、質粒的相容性/47
五、質粒的報告基因/48
六、質粒的改造/49
七、質粒載體的多克隆位點/50
八、質粒DNA 的提取/50
九、常用的質粒載體/52
十、質粒的用途與發展的質粒克隆載體/56
第三節 噬菌體載體/60
一、噬菌體和噬菌體載體/60
二、λ噬菌體的生物學/60
三、野生型λ 噬菌體的改造/64
四、λ噬菌體的包裝與克隆/65
五、單鏈噬菌體載體和噬菌粒/68
六、黏性質粒載體/70
第四節 酵母細胞克隆載體與酵母人工染色體/72
一、酵母附加體型質粒（YEps） /73
二、酵母整合型質粒（YIps） /74
三、酵母複製型質粒（YRps）與酵母著絲粒質粒（Ycps） /75
四、酵母人工染色體（YAC） /75
五、細菌人工染色體（BAC） 和噬菌體人工染色體（PAC） /77
六、穿梭質粒/79
第五節 動物病毒載體/81
一、動物病毒載體的特點/81
二、桿狀病毒載體/81
三、SV40載體/84
四、痘苗病毒載體/86
五、反轉錄病毒載體/86
六、其他動物病毒載體/88
第六節 植物病毒載體/88
複習思考題/89
第四章 目的基因的製取/91
第一節 目的基因製取的策略/91
一、外源基因與目的基因/91
二、目的基因製取的策略/91
第二節 鳥槍法製取目的基因/92
一、“鳥槍法”的概念/92
二、“鳥槍法”製取目的基因的特點/93
三、“鳥槍法”的主要步驟/94
四、枯草桿菌鳥槍法基因克隆/94
第三節 物理化學法分離目的基因/95
第四節 化學合成基因/95
一、聚核苷酸化學合成的歷史/96
二、磷酸二酯法合成DNA /97
三、固相亞磷醯胺法/98
四、DNA合成在基因工程和分子生物學研究中的套用/100
第五節 反轉錄合成DNA /102
複習思考題/104
第五章 基因與載體的連線/105
第一節 基因重組克隆與亞克隆/105
第二節 基因重組對載體的要求與載體類型/106
一、克隆載體/106
二、表達載體/106
第三節 連線前的處理/107
第四節 黏性末端連線/108
一、單酶切位點的黏端連線/108
二、雙酶切片段的定向克隆/111
三、不同限制酶切位點的黏端連線/112
第五節 平端連線/114
第六節 人工接頭連線/116
第七節 同聚寡核苷酸末端連線/118
複習思考題/120
第六章 重組DNA 導入受體細胞/121
第一節 克隆與導入方法/121
第二節 轉化/122
一、大腸桿菌宿主菌/122
二、受體細菌的感受態/123
三、轉化反應/123
四、枯草芽孢桿菌的轉化反應/124
第三節 轉染/125
一、磷酸鈣沉澱法/125
二、體外包裝轉染法/126
第四節 共轉化/126
第五節 電轉化/127
第六節 基因槍法（微彈技術） /129
第七節 微注射技術/130
第八節 脂質體導入法/131
第九節 轉化酵母菌/132
第十節 植物細胞的基因轉移方法/133
第十一節 哺乳動物細胞基因導入法/133
第十二節 反轉錄病毒載體的轉染/135
複習思考題/136
第七章 聚合酶鏈式反應/137
第一節PCR技術基本原理/137
第二節PCR反應體系與引物設計/141
一、PCR反應體系/141
二、設計PCR 引物時的一般原則/143
第三節PCR一般循環參數/144
第四節 影響PCR反應結果的因素/145
第五節PCR技術用於基因克隆/146
一、目的基因的直接克隆/146
二、目的基因的cDNA 的克隆/146
三、PCR技術用於基因克隆的其他方式/147
第六節 發展中的各種PCR套用技術/147
一、反轉錄PCR /147
二、反向PCR /149
三、複合PCR /150
四、定量PCR /153
五、不對稱PCR /153
六、嵌套PCR /154
七、免疫PCR /154
八、長PCR /155
九、熱啟動PCR /155
十、標記PCR（彩色PCR） /155
十一、重組PCR /156
十二、差向顯示PCR /156
十三、降落PCR /156
十四、兼併引物PCR /157
十五、原位PCR /157
十六、玻片PCR /158
十七、連線酶鏈反應（LCR） /158
十八、MSP甲基化特異PCR /160
第七節 各種PCR突變檢測技術/160
第八節 關於PCR技術套用的小結/162
複習思考題/162
第八章 基因文庫的構建/163
第一節 基因文庫的概念與文庫的類別/163
一、基因文庫的概念/163
二、基因文庫的類別/163
三、基因文庫的大小/165
第二節 基因文庫的構建/167
一、基因組文庫的構建/167
二、cDNA文庫的構建/171
第三節 利用PCR技術構建cDNA文庫/176
第四節 全長cDNA文庫的構建/178
一、cDNA文庫的質量與全長cDNA /178
二、RACE構建cDNA 文庫/179
三、用oligo-capping 法構建全長cDNA 文庫/181
四、SMART技術/183
第五節 差示文庫與消減文庫/186
一、mRNA差別顯示/186
二、差別雜交法與差示文庫/188
三、消減雜交法與消減文庫/190
四、代表性差異顯示（RDA） /192
五、抑制消減雜交/194
第六節 染色體或區域特異性cDNA文庫/197
第七節 人工染色體文庫/198
一、酵母人工染色體（YAC） 文庫/198
二、細菌人工染色體（BAC） 文庫/200
複習思考題/202
第九章 重組體的鑑定與文庫篩選/203
第一節 重組體轉化子的鑑定與文庫篩選/203
第二節 遺傳檢測篩選法/204
一、根據載體表型特徵的直接選擇法/204
二、根據插入序列表型特徵的直接選擇法/205
第三節 物理檢測法/205
一、凝膠電泳檢測法/205
二、限制酶切分析法/208
三、異源雙鏈雜交檢測法與R-環檢測法/208
第四節 核酸雜交法/209
一、以寡核苷酸探針篩選目的基因/209
二、原位雜交與寡核苷酸探針篩選文庫/212
三、Southern印跡雜交/213
四、Northern印跡雜交/214
第五節 免疫化學檢測法/214
一、各種標記的免疫化學檢測法/215
二、以單克隆抗體探針篩選目的基因/216
三、表達載體產物免疫化學檢測法/217
第六節 檢測蛋白質篩選克隆基因/217
第七節 體外表達篩選技術（表達檢測系統） /220
第八節cDNA文庫篩選的方法/223
第九節cDNA文庫的標準化/225
第十節BAC文庫鑑定和篩選/229
複習思考題/230
第十章 目的基因的表達/231
第一節 原核生物基因表達調控的生物學/231
一、原核細胞表達的特點/231
二、原核生物的轉錄調控/231
三、原核生物基因的轉錄後調控/233
第二節 真核生物基因表達的調控/234
一、DNA染色質結構的調控與順反子的概念/234
二、轉錄調控/234
三、RNA對基因表達的調控/235
四、翻譯過程的調控/235
第三節 基因工程中的基因表達/235
一、制約目的基因表達的因素/235
二、閱讀框架/236
三、啟動子及其保守序列的影響/236
四、終止子和衰減子的影響/237
五、翻譯過程對表達的影響/238
第四節 融合基因與融合蛋白的表達/239
第五節 以大腸桿菌為代表的原核表達體系/240
一、大腸桿菌表達系統的特點/240
二、大腸桿菌表達融合蛋白/240
三、大腸桿菌細胞包涵體/241
四、提高克隆基因在大腸桿菌中表達效率的途徑/242
第六節 表達型載體/243
第七節 真核表達體系的特點與外源基因在真核細胞表達/248
第八節 酵母表達體系/248
一、釀酒酵母中外源基因的表達/249
二、甲醇酵母中外源基因的表達/249
三、出芽酵母中外源基因的表達/249
四、常用的酵母轉化方法/250
五、酵母表達外源基因的缺陷和改進方法/250
第九節 昆蟲或昆蟲細胞表達體系/251
第十節 哺乳動物細胞表達體系/254
第十一節 新型的胞漿表達體系/254
複習思考題/255
第十一章 轉座子在基因工程中的套用/256
一、DNA的轉座現象與轉座子/256
二、質粒的轉座子/259
三、轉座作用的機制/259
四、轉座的遺傳學效應/260
五、控制轉座與監測轉座子/261
六、轉座子基因標籤法/261
七、標籤的策略/264
八、標籤基因的分離和克隆/265
九、轉座子技術的發展與套用前景/268
複習思考題/269
第十二章 核苷酸序列測定/270
一、Sanger酶法（ 雙脫氧鏈終止法） /270
二、Maxam-Gilbert DNA 化學降解法/273
三、定向測序法/276
四、鳥槍法測序/278
五、人工轉座子法/282
六、雜交測序技術/282
七、PCR測序/285
八、自動化測序法/286
九、幾種正在發展的測序方法/287
十、DNA序列測定的策略與發展方向/291
複習思考題/292
第十三章 基因克隆的策略和技術/293
第一節 基因克隆方法的種類/293
第二節 經典文庫克隆與特異抗體克隆技術/294
第三節 定位克隆策略/295
一、定位克隆的基本原理/295
二、定位克隆的三個主要步驟/297
三、定位克隆的主要操作過程/299
四、定位克隆的主要策略/303
五、大片段DNA 克隆文庫的載體/305
六、功能互作研究與定位克隆的套用與發展/305
第四節 表型克隆的策略/308
一、基因組錯配篩選（GMS） /308
二、隨機引物PCR /310
三、外顯子擴增技術(exon-PCR) /311
四、表型克隆與定位克隆策略的比較/311
第五節cDNA克隆策略/312
第六節 生物信息基因克隆技術/313
複習思考題/317
第十四章 基因打靶、反義技術與核酶技術/318
第一節 基因打靶技術/318
一、基因打靶的主要實驗系統/318
二、基因打靶的主要步驟/319
三、篩選基因打靶命中的細胞株/320
四、基因打靶技術的策略與技術/321
五、大規模隨機基因剔除——基因捕獲/324
六、基因敲入法研製轉基因小鼠/325
七、基因打靶技術的特點/326
八、基因打靶技術的套用/326
第二節 反義技術/327
一、反義鏈與反義寡核苷酸/327
二、反義技術的原理/329
三、人工設計反義RNA 的策略/329
四、反義技術的特點/331
五、ASON的改造與反義藥物/331
第三節 核酶技術/331
一、核酶的特性與作用/331
二、核酶的設計/332
三、核酶的克隆和套用/333
第四節 反義技術與核酶技術的套用/333
複習思考題/336
第十五章 蛋白質工程/337
第一節 蛋白質工程與基因工程/337
第二節 蛋白質結構分析、功能的設計與改造/338
一、蛋白質結構分析/338
二、蛋白質結構、功能的設計/338
三、蛋白質結構改造/338
第三節 蛋白質工程的一般流程/341
第四節 功能克隆策略——噬菌體展示技術/341
一、絲狀噬菌體展示系統/342
二、T4噬菌體展示系統/343
三、λ噬菌體展示系統/344
四、噬菌體展示基本操作過程/347
五、抗體表面展示/351
第五節 細菌表面展示生物技術/352
一、革蘭陰性菌表面展示/353
二、革蘭陽性菌表面展示/353
第六節 酵母表面展示系統/354
第七節 其他體外展示技術/354
第八節 蛋白質工程的新策略——分子定向進化/355
一、易錯PCR /355
二、DNA改組技術/355
三、交錯延伸技術/357
四、體外隨機引發重組/358
五、雜合酶技術/359
六、蛋白質分子定向進化技術的發展/359
第九節 蛋白質工程的套用與發展前景/360
複習思考題/361
第十六章 基因工程下游工程的分化/363
第一節 下游常用的分離、純化、分析鑑定技術/363
一、DNA合成粗產物的提純/363
二、蛋白質產品常用的分離提取技術/364
第二節 原核細胞表達系統與發酵工程/366
第三節 植物基因工程/366
第四節 昆蟲或動物細胞表達系統/368
第五節 動物基因工程/368
第六節 基因工程與產業化/369
第七節 基因工程藥物與疫苗/371
第八節 基因治療/372
複習思考題/373
索引/374
參考文獻/386
