《垂體性庫欣病的臨床分子生物學研究》是依託上海交通大學，由孫青芳擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：垂體性庫欣病的臨床分子生物學研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：孫青芳
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
垂體性庫欣病是由垂體ACTH腺瘤引起高皮質醇血症的一類臨床綜合徵，患者面臨內分泌紊亂及腫瘤生長的雙重威脅，嚴重危害其生活和生存。然而，庫欣病的具體發病機制尚不清楚。新近，我們首次發現PIP5KL1、ABCD2在垂體ACTH腺瘤中明顯下調,而COL14A1明顯上調。在以上重要發現的基礎上，我們將開展（1）PIP5KL1、ABCD2、COL14A1對細胞增殖、轉化及ACTH分泌功能的影響；（2）PIP5KL1、ABCD2、COL14A1作用機制的研究；（3）PIP5KL1、ABCD2、COL14A1在ACTH腺瘤的發生及培育轉基因鼠及研究腺瘤的發生髮展（4）PIP5KL1、ABCD2、COL14A1的表達與垂體腺瘤臨床分型的關係。擬通過以上研究，證明PIP5KL1、ABCD2、COL14A1參與庫欣病的發生、發展，可能為庫欣病的治療提供新的藥物靶點，並為垂體腺瘤的機制研究拓展新的方向。
結題摘要
庫欣病又稱垂體性皮質醇增多症，由垂體促腎上腺皮質激素腺瘤所致，是內源性庫欣綜合徵最主要的病因；患者面臨腫瘤生長及內分泌紊亂雙重打擊，生活質量差。然而，目前該疾病發生髮展的分子機制仍不清楚，缺乏有效的靶向藥物治療方法。本研究旨在探討庫欣病發生的分子機制，從而為該病藥物治療提供分子生物學基礎。（1）我們收集本研究中心13例庫欣病患者腫瘤組織和5例正常人垂體組織套用轉錄組測序技術進行基因表達譜分析，在檢測的99920個基因中，有241個基因表達差異大於2倍，功能涉及細胞外基質、細胞凋亡及激素合成的基因等。在差異表達的基因中，SFRP2下調尤為顯著。為進一步闡述該基因在庫欣病發生髮展中的作用，我們構建了SFRP2過表達慢病毒，轉染AtT20細胞株，進行體外細胞功能學研究，包括細胞增殖、分泌及相關信號通路的激活。結果表明，SFRP2可抑制AtT20細胞增殖、遷移及分泌，並能抑制Wnt/β-catenin信號通路，提示SFRP2抑制細胞增殖和遷移的功能一定程度上是通過拮抗Wnt通路實現的。進一步我們檢測到庫欣病人腫瘤組織β-catenin的水平也是升高的。同時我們分析了本中心26例庫欣病人腫瘤表型與SFRP2表達水平的關係，發現侵襲性腫瘤中SFRP2表達水平低於非侵襲性腫瘤，大腺瘤中SFRP2表達水平明顯低於微腺瘤。綜上，我們的研究表明，SFRP2基因的沉默可能參與該疾病的腫瘤進展，為庫欣病的分子靶向治療提供了有意義的線索。（2）我們用USP8抑制劑，9-ehtyloxyimino9H-indeno[1,2-b]pyrazine-2,3-dicarbonitrile，處理AtT20細胞能夠明顯抑制細胞增殖、抑制ACTH分泌及促進細胞凋亡，在細胞水平上證明了抑制USP8活性可能對庫欣病有治療作用。（3）我們研究發現，冷誘導RNA結合蛋白（CIRP）在垂體ACTH腺瘤中高表達；在小鼠促腎上腺皮質激素腫瘤細胞系AtT20細胞及庫欣病裸鼠模型中均具有促進阿片促黑素皮質素原（POMC）基因表達，促腎上腺皮質激素（ACTH）分泌及細胞增殖作用，且CIRP能上調MAPK通路蛋白ERK1/2的磷酸化水平；而敲除CIRP基因能夠逆轉上述表型。上述結果提示CIRP可能通過MAPK信號通路參與庫欣病的發生。
