《在應激反應中新信號通路軸p38-EGR1-PTEN的研究》是依託上海交通大學，由余健秀擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：在應激反應中新信號通路軸p38-EGR1-PTEN的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：余健秀
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
我們先前的研究表明，Pten基因是早期生長反應因子EGR1的一個重要生理靶子。本課題擬在這個重要發現的基礎上，採用2D膠-肽譜、基因定點突變、LC-MS/MS質譜分析、體內代謝[32]P同位素標記、磷酸化特異性抗體製備及探測等技術對EGR1的磷酸化位點進行體外體內鑑定。將研究在應激反應中p38激酶磷酸化的EGR1的功能與分子機理，包括磷酸化後的核內累積、穩定性、與DNA的結合能力、轉錄能力、與輔助或抑制蛋白的結合能力。在此基礎上，利用基因敲入和腫瘤移植等技術，獲得EGR1磷酸化位點突變的動物，進一步研究p38激酶磷酸化的EGR1的生理功能，最終闡明在應激反應中新信號通路軸p38-EGR1-PTEN的調控機制。相關工作將更加完善本課題組在國際上率先提出的EGR1、PTEN和p53/p73之間形成的精緻的抑癌網路調控理論，可望設計出以這些腫瘤抑制因子為靶標的新癌症治療方案。
結題摘要
我們先前的研究表明，Pten基因是早期生長反應因子EGR1的一個重要生理靶子。本課題在這個重要發現的基礎上，採用2D膠-肽譜、基因定點突變、LC-MS/MS質譜分析、體內代謝[32]P同位素標記、磷酸化特異性抗體製備及測定等技術對EGR1的磷酸化位點進行了體外體內鑑定，發現了多種激酶包括p38、 JNK1、 ERK1/2、 AKT1、PKC、CK1和CK2等可對EGR1磷酸化修飾。研究了在應激反應中p38激酶作用下的EGR1磷酸化的功能與分子機理，發現在S12/26和S492位點上的EGR1磷酸化修飾能有效地結合到PTEN啟動子區而導致PTEN基因轉錄；在S444位點上的EGR1磷酸化修飾可增加其自身穩定性。另外，Akt1作用下可發生在S350及T309位點上的EGR1磷酸化修飾, 前者影響EGR1在核內的累積。在此基礎上利用腫瘤移植技術，獲得EGR1磷酸化位點突變的動物腫瘤模型，證實了p38激酶作用下的EGR1磷酸化的生理功能，最終闡明了在應激反應中新信號通路軸p38-EGR1-PTEN的調控機制。該項目的完成豐富了本課題組在國際上率先提出的EGR1、PTEN和p53/p73之間形成的精緻的抑癌網路調控理論，為這些腫瘤抑制因子為靶標的新癌症治療方案提供了理論基礎。
