噬菌體展示：通用實驗指南

《噬菌體展示：通用實驗指南》是2008年化學工業出版社出版的圖書。本書是一本與時俱進、通俗易懂且兼容並包的噬菌體實驗設計和操作指南，對於那些在生物學研究和藥物開發中使用該項技術的讀者，具有很高的參考價值。

基本介紹

• 書名：噬菌體展示：通用實驗指南
• 作者：(美國)克拉克森(Tim Clackson)、(美國)洛曼(Henry B.Lowman)
• 譯者：馬嵐、盧帥、李銘
• ISBN：9787122027634
• 頁數：247頁
• 出版社：化學工業出版社
• 出版時間：2008年7月1日
• 裝幀：平裝
• 開本：16
• 正文語種： 簡體中文

內容簡介

《噬菌體展示:通用實驗指南》的目的是為了使研究工作者能夠設計和完成噬菌體課題中所涵蓋的各方面工作——從實驗策略的設計、噬菌體庫的構建到篩選的實施和結果的分析。《噬菌體展示:通用實驗指南》提供了如下內容：如何計畫一個成功的噬菌體展示實驗?

實驗設備和試劑列表實驗步驟構建噬菌體庫、進行親和篩選、分析所篩選克隆親和性噬菌體展示常規套用包括從肽庫中篩選配體、構建和使用噬菌體抗體庫以及使用(DNA庫展示進行表達克隆《噬菌體展示:通用實驗指南》的一大特色：在各章節中進行廣泛的交叉引用使得讀者能夠跳出所介紹的具體實驗步驟的限制，而對實驗步驟加以改造，使之能為自己感興趣的蛋白或篩選提供系統的服務。

目錄

第l章 噬菌體生物學及噬菌體展示簡介

1.1 簡介

1.2 絲狀噬菌體生物學

1.2.1 簡介

1.2.2 噬菌體顆粒的結構

1.2.3 感染

1.2.4 複製

1.2.5 基因和基因表達

1.2.6 噬菌體裝配生理學

1.2.7 噬菌體裝配機制

1.3 噬菌體展示所使用的衣殼蛋白

1.3.1 pⅧ蛋白

1.3.2 pⅢ蛋白

1.4 著手一個噬菌體展示項目

1.4.1 展示的可行性

1.4.2 筮菌體載體還是噬菌粒載體

1.4.3 多價展示還是單價展示

1.4.4 輔助噬菌體

1.4.5 籃菌體製備及定量的一般實驗方案

1.5 一個噬菌體展示項目的一般規則

1.5.1 一個文庫的生成

1.5.2 篩選

1.5.3 克隆的分析

1.6 常見的問題

1.6.1 文庫的質量

1.6.2 表達的編輯

1.6.3 過度篩選

1.7 作為替代的展示系統

1.8 筮菌體展示文庫及試劑盒的商業來源

參考文獻

第2章 使用寡核苷酸定向誘變構建噬茵體展示文庫

2.1 簡介

2.2 文庫設計的考慮

2.2.1 點突變

2.2.2 簡併密碼子的設計

2.2.3 理論的和實際的多樣性

2.3 定點誘變

2.3.1 定點誘變與盒式誘變的比較

2.3.2 寡核苷酸定向誘變的化學和生物學

2.3.3 無活性模板的構建

2.4 文庫的構建和保存

2.4.1 單鏈DNA模板的製備

2.4.2 異源雙鏈CCC-dsDNA的體外合成

2.4.3 大腸桿菌的電轉化和文庫噬菌體的製備

2.4.4 文庫的保存和再感染

2.5 生物試劑

參考文獻

第3章 體外DNA重組

3.1 導言

3.2 體外DNA重組的本底

3.2.1 體外DNA重組在定向進化中的使用

3.2.2 體外DNA重組的套用

3.2.3 重組統計學

3.3 體外DNA重組的方法

3.3.1 Stemmer法

3.3.2 來自大腸桿菌的內切核酸酶V的DNA的隨機片段化

3.3.3 隨機引物重組

3.3.4 交錯延伸程式

3.3.5 體外異源雙鏈的形成和體內修復（異源雙鏈重組）

3.3.6 重組方法的選擇

3.3.7 本底的消除

3.3.8 技術要點

參考文獻

第4章 為提高蛋白及多肽的親和性及特異性的噬菌體篩選策略

4.1 簡介

4.2 載體的考慮

4.2.1 單價和多價噬菌體展示

4.2.2 確保展示的成功

4.2.3 通過噬菌粒載體的蛋白質表達

4.2.4 載體的構建及噬菌粒的製備

4.3 文庫的設計

4.3.1 硬隨機突變

4.3.2 軟隨機突變

4.4 靶標的呈遞

第5章 用噬菌體ELISA快速鑑定噬菌體展示蛋白的結合親和性

第6章 使用重組肽庫為受體識別新配體

第7章 底物噬菌體展示

第8章 從噬菌體展示文庫中對穩定摺疊的蛋白質及蛋白質結構域進行的基於蛋白酶的篩選

第9章 鋅指結構與其他核酸結合性基序的噬菌體展示

第10章 噬菌體展示文庫在體內及體外的篩選

第11章 利用血清篩選噬菌體文庫

第12章 使用展示在噬菌體上的cDNA文庫進行相互作用克隆

第13章 噬菌體抗體文庫

第14章 噬菌體抗體的親和力成熟

附錄 普通供應商