《嗜麥芽窄食單胞菌外膜蛋白OMPs免疫保護作用的研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由李艷擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：嗜麥芽窄食單胞菌外膜蛋白OMPs免疫保護作用的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李艷
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
嗜麥芽窄食單胞菌已成為一種新興的全球性革蘭陰性條件致病菌，由於該菌對部分抗菌藥物天然耐藥和體外藥敏試驗結果的不確定性，給臨床抗感染治療帶來極大挑戰。目前，國內外針對嗜麥芽窄食單胞菌的免疫保護作用研究較少。本課題組前期研究發現，該菌的全菌抗血清具有強大的免疫調理功能，可增強人全血對細菌的殺傷作用，而革蘭陰性菌的外膜蛋白（outer membrane proteins，OMPs）作為細菌的一種重要免疫原性蛋白，已經在多種細菌中被證實具有保護作用。本研究以免疫蛋白質組學篩選具有免疫原性的嗜麥芽窄食單胞菌外膜蛋白，通過基因工程技術製備重組蛋白並對篩選到的蛋白進行免疫原性研究，評價重組蛋白（抗原）的免疫保護作用，發現新的保護性抗原，深入研究新的保護性抗原的可能生物學功能，尋找和開發亞單位疫苗候選分子，為該菌感染的治療和預防提供新的策略。
結題摘要
嗜麥芽窄食單胞菌( Stentrophomonas meltophilia, S. meltophilia )是一種全球性的多藥耐藥菌。嗜麥芽窄食單胞菌感染已成為一種嚴峻的挑戰。目前還沒有預防和治療嗜麥芽窄食單胞菌感染的有效措施，臨床上只能抗菌藥物聯合使用，但療效差。本研究目的是尋找和開發嗜麥芽窄食單胞菌外膜蛋白亞單位疫苗候選分子，為該菌感染的治療和預防提供新的策略。本研究通過免疫蛋白質組學篩選具有免疫原性的嗜麥芽窄食單胞菌外膜蛋白並用質譜對其進行鑑定，利用基因工程技術製備質譜鑑定出的外膜蛋白A（OmpA）和Smlt4123相應的重組外膜蛋白。用嗜麥芽窄食單胞菌滅活全菌（IWC）與重組外膜蛋白皮下免疫小鼠，通過體外調理吞噬實驗和體內攻毒實驗分別評價IWC與重組外膜蛋白的免疫保護作用，發現皮下免疫IWC和重組外膜蛋白均可誘導小鼠產生高水平的IgG抗體；IWC抗血清和重組外膜蛋白Smlt4123（rSmlt4123）的抗血清在體外具有明顯的調理殺傷作用，而重組外膜蛋白A（rOmpA）抗血清沒有表現出明顯的調理殺傷作用；皮下免疫rSmlt4123在體內的攻毒試驗中可明顯降低免疫組小鼠血中的菌量。用rOmpA滴鼻免疫小鼠，發現滴鼻免疫rOmpA可誘導小鼠產生系統性的抗體反應和局部性的抗體反應，通過體外再刺激免疫小鼠的脾細胞發現滴鼻免疫rOmpA可誘導小鼠產生高水平IFN-γ、IL-2、IL-17A細胞因子，通過滴鼻攻毒實驗發現攻毒後24h，滴鼻免疫rOmpA可降低免疫組小鼠肺組織的菌量和肺泡灌洗液炎症因子（TNF-α、IL-6）的水平。綜上所述，我們通過蛋白質組學篩選出具有免疫原性嗜麥芽窄食單胞菌外膜蛋白，並通過體內外實驗驗證、評價外膜蛋白的免疫保護性，結果顯示Smlt4123和OmpA蛋白可以作為對抗嗜麥芽窄食單胞菌感染的疫苗候選分子。
