嗜血桿菌屬因子實驗是協助對嗜血桿菌屬種進行鑑定的一種試驗方法。
原理,試劑,操作程式,結果,陰陽性對照,注意事項,
原理
嗜血桿菌生長需要X因子(正鐵血紅素)和/或 V因子(煙醯胺腺嘌呤二核苷酸)。
試劑
MH瓊脂平板,X、V 、X+V因子紙片。
操作程式
- 制0.5麥氏濃度的菌液,在MH瓊脂平板均勻塗布。
- 無菌操作將紙片貼於接種好的平板上,同一平板上同時接種X、V 紙片時中心距離>24mm
- 35℃、5%~10%CO2環境孵育18~24h後觀察結果
結果
- 僅需要V因子生長的有副流感嗜血桿菌、副溶血嗜血桿菌、副嗜沫嗜血桿菌。
- 僅需要X因子生長的有杜克嗜血桿菌。
- 同時需要X+V因子生長的有流感嗜血桿菌、溶血嗜血桿菌。
- 嗜沫嗜血桿菌不依賴因子生長
陰陽性對照
- 陽性:流感嗜血桿菌ATCC49247
- 陰性:副流感嗜血桿菌ATCC7901
注意事項
- 用MH瓊脂平板做此實驗。
- 紙片一旦貼下就不能再進行移動。
- 同一平板上同時接種X、V 紙片時中心距離>24mm。
- 紙片平衡至室溫才能使用。
- 在5%~10%CO2環境孵育。