問號鉤體保守外分泌蛋白LA_0505的致病功能及機制研究

《問號鉤體保守外分泌蛋白LA_0505的致病功能及機制研究》是依託南昌大學，由曾令兵擔任項目負責人的地區科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：問號鉤體保守外分泌蛋白LA_0505的致病功能及機制研究
• 項目類別：地區科學基金項目
• 項目負責人：曾令兵
• 依託單位：南昌大學

項目摘要

本項目前期的問號鉤體外分泌蛋白質組研究，在國際上鮮有報導。在此基礎上，我們發現了問號鉤體中新的高度保守的外分泌蛋白-LA_0505，與問號鉤體的致病性存在一定聯繫。因此，我們擬通過質譜、蛋白晶片以及分子生物學等技術，對LA_0505的功能及致病機制進行深入地研究，主要包括：1. 研究LA_0505與Ca2+、細胞外基質（ECMs）、FH和C4Bp的體外結合作用，並進一步驗證Ca2+是否能促進LA_0505與ECMs、FH和C4Bp的結合作用;2.系統性地分析LA_0505刺激單核-巨噬細胞產生的炎症因子（如TNFα等），鑑定LA_0505所作用的TLR受體，確證LA_0505刺激單核-巨噬細胞產生炎症因子的免疫通路。本研究為闡明問號鉤體的致病因子及致病機制、加深對鉤體病發生和發展規律的認識提供新的依據。

結題摘要

鉤端螺旋體病是一種全球範圍內流行的人獸共患病。問號鉤體是鉤端螺旋體病的主要病原體。研究問號鉤體的致病因子及疫苗候選靶標對於預防和治療鉤端螺旋體病都有重要的意義。本項目針對問號鉤體的保守表面暴露蛋白-Big結構域蛋白進行了深入研究。研究結果顯示，在動物感染模型中，該蛋白在各個臟器中的表達量上調。並且，藉助該蛋白與單核-巨噬細胞的相互作用研究，提示該蛋白可能通過與細胞表面TLR4受體結合，調控κB通路，刺激細胞產生TNFα，同時抑制IL10的表達。除此之外，本課題實施過程中，同時評估了該Big結構域蛋白及其他保守的問號鉤體表面暴露蛋白對感染動物的保護性。最終發現，這些蛋白能夠刺激宿主產生較高滴度的抗體，但是並不具有相應的保護性。提示這類蛋白能用於問號鉤體的診斷，但不適合作為問號鉤體的疫苗候選靶標。經過本課題的實施，我們初步闡明了問號鉤體Big結構域蛋白的作用機制，並且評估了該蛋白及其他問號鉤體保守表面暴露蛋白的動物保護性，為後續問號鉤體致病機制及疫苗靶標的研究提供了一定的思路。