咪唑鹽MNIB對腫瘤細胞蛋白合成的作用及相關機制研究

《咪唑鹽MNIB對腫瘤細胞蛋白合成的作用及相關機制研究》是依託雲南大學，由曾祥慧擔任負責人的國家自然科學基金專項基金項目。

基本介紹

• 中文名：咪唑鹽MNIB對腫瘤細胞蛋白合成的作用及相關機制研究
• 負責人：曾祥慧
• 依託單位：雲南大學
• 項目類型：專項基金項目

項目摘要

延伸因子EF2是決定蛋白合成的延長階段的關鍵分子，參與調控細胞周期的進展， EF2信號轉導通路對於腫瘤細胞的生長和增殖不可或缺。前期研究表明咪唑鹽類化合物MNIB具有顯著的體內外抑制腫瘤增殖活性，發現MNIB可明顯降低磷酸化EF2蛋白水平，阻滯腫瘤細胞於G1期，引起腫瘤細胞凋亡。本項目擬在前期工作的基礎上，套用放射分析、酶反應動力學、螢光顯微動態觀察、免疫印跡等細胞及分子生物學實驗技術，研究MNIB對細胞蛋白合成的影響，對細胞內信號轉導通路的調控機制，探索其作用靶點，闡明其抑制腫瘤細胞增殖的機理，為研究療效好、副作用小的新型咪唑鹽類抗腫瘤先導化合物提供實驗基礎。

結題摘要

1. 本課題按實驗方案建立了蛋白合成速率檢測、細胞內ATP及活性氧自由基的檢測方法，最佳化了實驗條件。選擇不同濃度的受試化合物MNIB作用在不同時間段，檢測了細胞凋亡程度及細胞周期的變化。與蛋白合成直接相關的核糖體非常關鍵，游離核糖體位於位於細胞質基質中，主要合成胞內蛋白；附著核糖體主要附著在內質網和線粒體上，負責合成外運蛋白。本課題進一步研究了內質網及線粒體功能，檢測了線粒體膜電位，氧化損傷等變化，為研究MNIB調節細胞凋亡信號通路提供了信息。 2. 本課題按實驗方案建立了細胞免疫化學、動態螢光顯微觀察的實驗方法。選擇常用化療藥物doxorubicin做細胞毒性陽性對照，檢測了核內DNA嵌入導致細胞凋亡的特點，並研究與JNK信號通路的關係。該實驗結果對於鑑別化合物MNIB的藥理活性特點，通過分析其與陽性藥的異同，有助於研究其作用機制及確定其作用靶點有重要意義。 3. 本課題執行期間，鑒於當前納米抗腫瘤藥物的快速發展，結契約時開展的其他合作項目，引入了納米新劑型到本課題研究，初步結果顯示納米載體可以提高抗腫瘤化合物的治療效果，納米劑型結合咪唑鹽MNIB將起到更強的抗腫瘤作用，同時減低了該化合物的毒性，開拓了本課題的後續研究方向。該部分研究內容屬於必要的調整。 4. 本課題結果分別在Biomaterials(IF 8.312), Biomacromolecules (IF 5.479), Pharmazie (IF 1.003)等雜誌以第一作者發表研究論文各一篇。參與研究分別在ACS Nano (IF 12.033), Soft Matter (IF 4.39), Journal of Polymer Science Part A: Polymer Chemistry (IF 3.919 ), Investigational New Drugs (IF 3.357), RSC Advances(IF 3.708)等雜誌各發表一篇研究論文。參編論著一本:Update on Polymer Based Nanomedicine,由英國Smithers Rapra Publishing出版。 5. 本課題執行期間，指導了一名碩士生（張宇寧）課題，參與指導了兩名博士生（周永雲，王蕊）課題。建立並加強了國際合作。