台式光電關聯顯微鏡集合了台式掃描電子顯微鏡的優點,利用整合式集成化的設計,使掃描電鏡圖像與螢光圖像完美疊加,對於光電關聯樣品的功能和結構信息的匹配定位發揮極其重要的作用。
簡介,設計原理,套用領域,
簡介
光電關聯顯微鏡結合螢光顯微鏡和電鏡的優勢,通過在螢光照片中疊加電鏡照片,實現在一張圖像里獲得螢光的功能物質信息和電鏡的高分辨結構信息。
根據螢光顯微鏡和電鏡的整合程度,光電關聯顯微鏡主要分為分散式和整合式。分散式關聯技術,螢光顯微鏡和掃描電鏡是兩台獨立的機器,共用一個樣品載具,載具上有機械校準點,兩種顯微鏡通過機械校準來對同一位置點觀察,這種技術由於涉及到機械校準過程,定位和圖像重合精度不高;整合式光電關聯技術將兩種顯微鏡集成在一台機器內,兩種光路直接對同一位置點觀察。光電關聯顯微鏡作為一項新興的交叉技術,相當於給電鏡裝上了導航的眼睛,提高結構解析的效率。
台式掃描電子顯微鏡相較於大型鎢燈絲電鏡其具有體積小巧、操作簡便、價格便宜、快速抽真空、不用噴金測量不導電樣品等優勢,而且它的放大倍數可高達 130,000 倍,解析度 14 nm。此類新型儀器的出現填補了光學顯微鏡與傳統大型掃描電子顯微鏡之間的空白區域,可廣泛套用於材料科學、納米顆粒、生物醫學、食品藥品、紡織纖維、地質科學等諸多領域。
設計原理
在光電關聯顯微鏡技術中,也可以採用台式掃描電鏡來組合螢光電鏡形成台式光電關聯顯微鏡,其具有台式電鏡的所有優點,同時高度集成化的設計保證了其性能的高度穩定。螢光和台式掃描電鏡結合的台式光電關聯顯微鏡可以簡化光電關聯工作流程。
其設計原理如圖一所示:
其在台式掃描電鏡的下方集成螢光顯微鏡光源並使兩種光路直接對同一位置點觀察,消除了重定位難問題,另外得益於整合的光路結構,兩種圖像能通過陰極螢光自動匹配,重合精度更高。
其精確對中的關鍵在與使用了電子束轟擊半導體材料產生的陰極螢光效應,該陰極螢光信號被螢光相機接收作為臨時的基準點,這些基準點與台式掃描電鏡的電子束掃描區域完美吻合,因此可以實現無偏差的掃描電鏡圖像與螢光圖像疊加,重合精度非常高。
套用領域
台式光電關聯顯微鏡可以套用於生命科學及其分支,如生物醫藥研究、細胞生物學、發育生物學、血液學、微生物學、神經生物學等。醫學及其分支如心臟病學、腫瘤學、藥理學等以及食品科學領域等。