口服白朮對口蹄疫疫苗的免疫增強作用及其機理研究

《口服白朮對口蹄疫疫苗的免疫增強作用及其機理研究》是依託浙江大學，由胡松華擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：口服白朮對口蹄疫疫苗的免疫增強作用及其機理研究
• 依託單位：浙江大學
• 項目負責人：胡松華
• 項目類別：面上項目

項目摘要

我們的前期研究已經證明中藥白朮具有口服佐劑作用，給小鼠口服白朮水煎液之後免疫注射口蹄疫疫苗，動物對口蹄疫疫苗的免疫應答顯著增強。本申請項目在此基礎上，進一步研究白朮內酯、揮髮油和多糖三個主要提取部位對口蹄疫疫苗免疫的佐劑作用，以及口服白朮對動物腸道局部黏膜免疫的影響，探討口服白朮增強口蹄疫免疫的作用機理。研究結果對於揭示免疫增強類中藥的作用機理，豐富中藥的藥性理論具有重要的理論意義，也為拓寬白朮的套用範圍，為今後研究開發免疫增強類中藥產品提供依據，具有重要實際套用價值。

結題摘要

本項目研究了中藥白朮不同提取部位對小鼠免疫增強的活性作用。從生藥白朮中提取白朮多糖和白朮揮髮油，白朮多糖得率為4.2%，多糖含量為86.2%，由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖組成，物質的量比為：1.00 : 2.49 : 2.07 : 4.94 : 11.33 : 1.35；白朮揮髮油，油顯金黃色，粘稠、有香氣，得率為1.185%。1. 通過研究白朮多糖、白朮揮髮油和白朮內酯Ⅰ對口蹄疫疫苗的免疫增強作用，篩選出了具有免疫佐劑作用的提取物。動物試驗表明，口服白朮多糖可明顯提高小鼠產生的抗FMDV特異性抗體的水平，而口服白朮揮髮油和白朮內酯Ⅰ則不能提高小鼠血清中特異性抗體水平。2. 通過觀察白朮多糖口服給藥對小鼠皮下注射口蹄疫疫苗的免疫反應，證明了口服白朮多糖能夠顯著提高小鼠對口蹄疫疫苗免疫產生的免疫應答，促進T、B淋巴細胞活化，並激活Th1和Th2型免疫應答反應，對FMD疫苗具有口服佐劑作用。3. 通過觀察口服白朮多糖對小鼠腸道黏膜免疫系統的影響，證明了口服白朮多糖可顯著提高小鼠血清中抗FMDV特異性抗體水平。口服白朮多糖後1周后，小鼠十二指腸內容物中IgA水平、腸道IgA+漿細胞面積、腸組織TGF-β、IL-6、TNF-α mRNA表達水平以及小腸IEL細胞數目均顯著高於對照組。因此，口服白朮多糖可提高小鼠腸道黏膜免疫水平，灌胃後1周的效果要高於灌胃後2周。4. 通過觀察白朮多糖通過注射途徑有無佐劑作用以及體外對模式識別受體有無作用，證明了白朮多糖或黃芪多糖和OVA混合後注射小鼠能顯著提高動物血清中抗OVA特異性抗體及亞類IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3水平，說明白朮多糖皮下注射後亦具有免疫佐劑作用。白朮多糖和黃芪多糖對細胞上清中SEAP的水平沒有影響，表明白朮多糖和黃芪多糖並不能刺激Raw-Blue細胞NF-κB的表達，對TLRs、NLRs或RLRs等PRRs無作用；綜上所述，口服白朮揮髮油和白朮內酯Ⅰ對FMD疫苗無免疫增強作用，而口服白朮多糖可顯著提高小鼠血清的抗FMDV特異性抗體水平，促進T、B淋巴細胞的增殖，提高Th1和Th2型免疫應答，增強小鼠腸道黏膜免疫水平，表明白朮水煎劑的口服佐劑作用主要是由白朮多糖所引起；白朮多糖皮下注射後亦具有免疫佐劑作用。