《去甲腎上腺素α2A受體的鎮痛調節新靶點- - -CSK》是依託蘭州大學，由胡曉東擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：去甲腎上腺素α2A受體的鎮痛調節新靶點- - -CSK
- 依託單位：蘭州大學
- 項目負責人：胡曉東
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
激動脊髓α2A受體（α2AR），能夠有效抑制神經病理性疼痛，但α2AR究竟通過何種信號途徑、實現對慢性疼痛的調節，目前仍不清楚。資料顯示：酪氨酸激酶Fyn，通過磷酸化NMDA受體的NR2B亞基，能夠顯著增強NR2B介導的脊髓痛覺信息的突觸傳遞、對誘發痛覺過敏極為關鍵。而申請者的預實驗意外的發現：激動α2AR，能夠滅活突觸Fyn、阻斷Fyn對突觸NR2B的酪氨酸磷酸化！而這一過程可能與Fyn的一種抑制性調控蛋白- - -C-末端src激酶（CSK）有關。申請者發現：激動α2AR，會快速動員抑制性的CSK向突觸運動、顯著提高CSK的突觸含量，提示可能存在這樣一條信號途徑，即：α2AR→促進CSK向突觸分布→增強CSK對突觸Fyn/NR2B的抑制性控制而鎮痛。本項目的研究目標，在於全面解析這一新的信號途徑在脊髓痛覺信息調控中的作用，並深入探討增強CSK的突觸動態分布對神經病理性疼痛的抑制效應。
結題摘要
本項目的研究目標，在於建立“α2A受體--C-末端src 激酶（CSK）--NR2B受體”這一信號轉導通路，並探討該通路與痛覺調控的關係。本項目嚴格按照計畫書進行，各項研究均順利進行，實現了預期的研究目標。實驗結果顯示：（1）α2A受體能夠通過G蛋白的Gβγ亞基實現對慢性病理性疼痛的抑制，因為脊髓背角表達β-腎上腺素受體激酶-1 的胞漿C-末端序列（β-ARK1ct）、以封閉內源性Gβγ 的功能，會顯著拮抗α2A受體的鎮痛效應；（2）脊髓背角神經元大量表達CSK；α2A受體通過Gβγ信號通路，能夠動員CSK向突觸再分布，逆轉外周組織損傷誘發的CSK突觸失定位；（3）為驗證CSK是α2A受體/Gβγ信號通路的下游調控靶點，本項目構建重組腺病毒表達載體，使背角神經元表達無活性的CSK 突變體 [CSK(K222R)]、以干擾內源性CSK 的功能，發現： CSK(K222R)會明顯減弱α2A受體的鎮痛效應；（4）α2A受體/Gβγ信號通路通過改變CSK的突觸分布，能夠逆轉外周組織損傷誘發的脊髓背角NR2B受體的功能亢進；（5）通過重組腺病毒表達載體，直接在脊髓背角神經元中表達外源性的野生型CSK [CSK(WT)]、以增強CSK的突觸功能，能夠模擬α2A受體激動劑的作用，緩解組織損傷誘發的慢性病理性疼痛症狀，抑制脊髓背角NR2B受體介導的興奮性突觸後電流（excitatory postsynaptic currents; EPSCs）幅值，逆轉NR2B受體在突觸後緻密質中的表達水平。本研究全面而系統地建立了“α2A受體--CSK--NR2B受體”這一信號轉導途徑，從而為深入揭示α2A受體的鎮痛機制提供了全新的實驗依據。
