《原發性膽汁性肝硬化中B1細胞免疫學特性的研究》是依託上海交通大學，由尤征瑞擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：原發性膽汁性肝硬化中B1細胞免疫學特性的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：尤征瑞
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
原發性膽汁性肝硬化（PBC）是以肝內膽管細胞損傷為主的自身免疫性肝病，患者血清存在高滴度抗線粒體抗體（AMA），IgM水平顯著增高。我們前期實驗發現PBC肝記憶體在大量IgM陽性B細胞，且膽管周圍分布許多樹突狀細胞。最新鑑定的B細胞亞群-B1細胞可分泌IgM、刺激T細胞活化，在自身免疫反應中發揮重要作用。我們假設：樹突狀細胞將膽管上皮細胞丙酮酸脫氫酶複合體-E2（PDC-E2）抗原遞呈至B細胞，B1細胞活化，產生高水平IgM和AMA，活化T細胞，參與膽管細胞免疫攻擊。擬回答以下科學問題1.PBC體內B1細胞有無明顯變化？B1細胞數量與肝內炎症、纖維化是否存在相關性？2.B1細胞是否存在 PDC-E2抗原特異性受體？PDC-E2抗原能否刺激B1細胞增殖，產生高水平IgM和AMA，活化T細胞。3.觀察PBC小鼠體內回輸B1細胞是否對膽管損傷有影響？本研究有利於闡明PBC免疫機制，提供潛在干預靶點
結題摘要
人類B1細胞可以CD11b為標誌再區分為兩個亞群，其中CD11b+ B1細胞約占全部B1細胞的10%，大量表達CD86，可刺激CD4+T細胞活化擴增；而CD11b-B1細胞占B1細胞的絕大多數，可以自發合成分泌天然免疫球蛋白。因為B1細胞的這兩種功能，研究者推測其可能參與了自身免疫病的發病機制，但目前尚缺乏B1細胞在原發性膽汁性膽管炎（原發性膽汁性肝硬化，現已更名為原發性膽汁性膽管炎）的相關研究。我們採用流式細胞術檢測AIH、PBC患者和健康對照者外周血中B1及其他B細胞亞群的比例變化。結果顯示AIH和PBC患者外周血B細胞中B1細胞的比例較健康對照明顯增加。AIH和PBC患者B1細胞中CD11b+亞群的比例較健康對照明顯增加。活動期AIH患者的CD11b+亞群比率較緩解期的患者明顯增加。流式細胞術分選出CD20+CD27+CD43+B1細胞體外培養，並用丙酮酸脫氫酶複合體-E2（PDC-E2）抗原刺激B1細胞，ELISA技術檢測IgM分泌水平變化。結果顯示與健康對照相比，AIH患者、PBC患者外周血CD20+CD27+CD43+B1細胞IgM分泌水平明顯升高，體外培養後PDC-E2抗原刺激，PBC外周血B1細胞IgM分泌水平明顯升高，與正常人及AIH患者比較有統計學意義。初步結果顯示B1細胞可能在原發性膽汁性膽管炎發病中發揮重要作用，後續相關實驗正在進行中。 此外，我們課題組在本項目實施過程中還研究髓系抑制細胞（MDSCs）在原發性膽汁性膽管炎發病過程中發揮的作用及機制。結果提示PBC患者外周血和肝內均出現單核型MDSCs的明顯積聚，且MDSCs具有強大的免疫抑制功能。在PBC患者肝內，受傷的小膽管可高表達CCN1，CCN1通過與MDSCs表面的整合素受體integrinαMβ2結合，促進STAT3的磷酸化，從而促進MDSCs擴增。同時CCN1還可誘導MDSCs高表達iNOS, 抑制T細胞的增殖。功能性MDSCs是維持PBC患者肝內免疫穩態的重要負發揮機制，可抑制過度活化的T細胞介導炎症反應。CCN1對功能性MDSCs的調控作用具有潛在的免疫治療價值。
