《厚莢相思體細胞胚胎髮生相關miRNA功能分析研究》是依託北京林業大學，由謝響明擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：厚莢相思體細胞胚胎髮生相關miRNA功能分析研究
- 依託單位：北京林業大學
- 項目負責人：謝響明
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
植物生長發育的分子調控機制是發育生物學的一個重要研究課題。研究表明，在體胚發生早期階段，植物微小RNA（miRNA）靶向很多重要的發育轉錄因子，在植物細胞分裂和生長發育中起至關重要的作用。miRNA是一類長約20-24個核苷酸的小分子非編碼RNA，通過與靶基因mRNA的特定位點結合，抑制該蛋白的合成或誘導該mRNA的降解，參與基因的表達調控。厚莢相思是我國南方重要速生造林樹種，具有適應性強、耐貧瘠乾旱等特點，研究其體胚發生具重要意義。本研究擬在前期基礎上鑑定、分離厚莢相思胚胎髮生過程具重要功能的相關miRNA，通過晶片表達譜、雙向電泳蛋白譜及生物信息方法對靶基因進行預測和鑑定，基於正反向遺傳學方法分析miRNA功能，研究調控體胚發生的相關miRNA及其靶標基因，推測分子調控機制，有望通過人工方法調控體細胞胚胎髮生。該研究不僅對生產具有實際意義，更能為豆科木本植物體細胞胚發生奠定理論基礎。
結題摘要
microRNA (miRNA)是一類長度在19-25個核苷酸的內源性非編碼單鏈調控RNA。近年來，越來越多的研究證明miRNA參與了許多重要的生物學過程。厚莢相思是我國南方重要速生造林樹種，因其適應性強、耐貧瘠乾旱等特點而成為重要的研究對象。體細胞胚胎髮生是植物進行大規模擴繁的重要途徑，研究表明在體胚發生早期階段，植物miRNA靶向許多重要發育相關轉錄因子，在植物細胞分裂和生長發育起到至關重要的作用。我們針對這些問題進行了深入的研究。（1）我們在探索厚莢相思體胚發生系統的培養條件的過程，建立了以成熟合子胚為外植體，獨特、高效的新器官發生途徑（再生率達76.9%）。（2）以新途徑的不同發育階段為材料構建RNA文庫，用高通量測序及生物信息學分析，鑑定與描述了參與厚莢相思器官發生過程的保守miRNA（189條）和新候選miRNA（9條），並進行了靶基因預測（237條）以及GO分析。（3）利用基因晶片技術鑑定在不同階段顯著上調或下調的miRNA。（4）利用Real-time PCR技術對miRNA的表達量進行鑑定。完成了首次對厚莢相思器官發生過程miRNA的鑑定，並為miRNA在此途徑中不同生理過程的作用的研究打下了基礎。
