《卵母細胞與顆粒細胞通過CFTR以HCO3-進行對話機制的研究》是依託浙江大學,由金麗擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名:卵母細胞與顆粒細胞通過CFTR以HCO3-進行對話機制的研究
- 依託單位:浙江大學
- 項目負責人:金麗
- 項目類別:青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
無論是自然妊娠還是輔助生育,卵母細胞的成熟都是最為基礎和極其關鍵的一步。而卵母細胞的生理活動,始終處於顆粒細胞的調控下有序地發育、成熟或凋亡。但卵母細胞與顆粒細胞的交流對話機制至今未得到完整的闡述。CFTR是一種Cl- 和HCO3- 的通道,屬於ATP結合轉運體超家族,是兼有通道和受體功能的一種調節蛋白,在細胞代謝、增殖、分化等基本功能活動中具有重要的功能。HCO3-通過CFTR進入胞內後作用於可溶性腺苷酸環化酶(sAC)上調胞內cAMP,使CREB磷酸化水平增加,並最終通過p-CREB調節相應基因的表達而影響細胞的發育。本課題前期工作已發現在顆粒細胞和卵母細胞胞膜上都有CFTR存在,是否提示這兩種密切相連的細胞通過CFTR進行對話,並調節卵母細胞的發育和成熟?本課題擬通過細胞培養、蛋白分析、核酸測定、胞內pH測定等實驗手段,探討卵母細胞和顆粒細胞通過CFTR以HCO3進行交流對話的機制。
結題摘要
囊性纖維化跨膜電導調節體(CFTR) 是一種Cl- 和HCO3- 的通道,屬於ATP結合轉運體超家族。其中,HCO3- 通過CFTR的轉運出入細胞對細胞功能有著更為重要的作用,尤其對生殖有著重要的作用,由CFFR基因突變引起的囊性纖維化變性(CF)能夠導致男性和女性生育能力下降,甚至不育。已有臨床資料顯示,CF女性存在不排卵和卵巢激素水平異常的現象,提示CFTR在排卵和激素分泌等卵巢功能中起到一定的作用。為探索CFTR在卵巢中的表達和作用,本研究用RT-PCR、Western blot和免疫螢光的方法檢測了CFTR在顆粒細胞和卵母細胞中的表達;並用卵母細胞體外成熟的方法研究CFTR在卵母細胞成熟過程中的作用。研究結果顯示,CFTR在性成熟的小鼠顆粒細胞和卵母細胞上都有表達,表達和動情周期無關。小鼠卵母細胞體外成熟實驗的結果顯示,CFTR抑制劑和腺苷酸環化酶抑制劑均能顯著抑制第一極體的釋放,降低卵母細胞成熟率(p)