南方根結線蟲類毒液過敏原蛋白基因的功能研究

《南方根結線蟲類毒液過敏原蛋白基因的功能研究》是王暄為項目負責人,南京農業大學為依託單位的青年科學基金項目。

基本介紹

  • 中文名:南方根結線蟲類毒液過敏原蛋白基因的功能研究
  • 項目類別:青年科學基金項目
  • 項目負責人:王暄
  • 依託單位:南京農業大學
項目摘要,結題摘要,

項目摘要

南方根結線蟲(Meloidogyne incognita)是一種致病性很強的植物寄生線蟲,給世界農業生產尤其是大棚蔬菜的種植造成了巨大的經濟損失。在當前國內外對根結線蟲寄生機理尚不明確的背景條件下,本項目選擇南方根結線蟲寄生相關基因類毒液過敏原蛋白(venom allergen-like protein)基因作為研究對象,分別通過酵母雙雜交系統釣取互作蛋白的編碼基因,轉基因植物過表達靶標基因後觀察植物生長表型變化,RNA干涉(RNAi)誘導基因沉默後分析線蟲致病力變化等研究,系統的分析南方根結線蟲類毒液過敏原蛋白基因的功能,研究結果不僅對揭示植物寄生線蟲與寄主互作的分子機理有重要的理論意義,同時對通過套用生物技術的手段設計新型的根結線蟲防治策略也具有直接的套用價值。

結題摘要

南方根結線蟲(Meloidogyne incognita)是一種非常重要的植物內寄生線蟲,給世界農業生產造成了巨大的經濟損失,分析其在寄生過程中所表達基因的功能是明確線蟲與寄主互作分子機制的關鍵,同時也是提供有效防治該病害策略的基礎。本研究以南方根結線蟲類毒液過敏原蛋白(venom allergen-like protein)Mi-vap-2基因為研究對象,探索該基因線上蟲寄生過程中的作用,目前已取得如下研究進展和結果:(1)培育了過表達Mi-vap-2基因的轉基因菸草,表型觀察顯示Mi-vap-2在寄主植物中表達對植物器官的正常發育無明顯影響;(2)構建了包含線蟲侵染前與侵染後不同時間段菸草根系混合材料的cDNA文庫,克服了以往線蟲寄主互作研究只針對線蟲侵染前材料的局限性,豐富了線蟲互作基因研究的覆蓋範圍,同時通過酵母雙雜實驗證實Mi-vap-2與已報導的馬鈴薯金線蟲同一家族基因Gr-vap1存在不同的作用靶標;(3)建立了菸草脆裂病毒(Tobacco rattle virus, TRV)介導的植物線蟲基因沉默體系,以Mi-vap-2基因為靶標的研究證實抑制該基因的表達後線蟲的繁殖數量及發育均無明顯變化,本研究初步明確了南方根結線蟲Mi-vap-2基因與線蟲致病性的關係,同時建立的研究體系為下一步開展大規模線蟲基因功能驗證提供了保障。
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