北京五加和分子醫學研究所有限公司（Beijing FivePlus Molecular Medicine Institute Co. Ltd. , 5+MMI）成立於2005年，註冊地點在北京經濟技術開發區，獲得北京市高新技術企業認證，是進行醫學生物技術研發和服務的公司，致力於病毒載體的不斷創新和產業化推進。
基本介紹
- 公司名稱：北京五加和分子醫學研究所有限公司
- 外文名稱：Beijing FivePlus Molecular Medicine Institute Co. Ltd. , 5+MMI
- 總部地點：北京
- 成立時間：2005年
- 經營範圍：病毒載體研究
公司簡介,主要發展方向,業務範圍,承擔和參與的國家課題項目,獲得的資質,發展歷程,代表性文章,產品與技術服務,重組病毒產品,載體質粒產品,製備動物模型新產品,miRNA生物感測器,更多產品,技術服務,合作單位,人文理念,
公司簡介
公司目前已經擁有500平方米的病毒載體實驗室和200平方米的病毒載體中試生產車間，另正在建設800平方米的2條病毒載體與疫苗項目的中試生產線，還獲得北京經濟技術開發區政府授予的“病毒載體公共服務平台”資質。
公司主要創始人董小岩博士，1988年畢業於第一軍醫大學，畢業後從事心腦血管疾病的臨床工作。2010年博士畢業於復旦大學遺傳學專業，師從薛京倫教授。多年來一直從事病毒載體與基因治療的研究開發工作，並先後師從於王小寧教授和侯雲德院士；與吳小兵教授等組成團隊共同開發了AAV/HSV-rc病毒載體系統，先後創建了本元正陽基因技術有限公司和北京五加和分子醫學研究所有限公司
公司的使命是努力促進基因治療從基礎研究走向臨床直至取得最後的成功，為人類攻克難治性疾病提供劃時代的新藥、好藥。為此，公司的研發團隊一直致力於基因治療關鍵技術研究，在病毒載體尤其是AAV病毒載體的改進、生產系統的最佳化、規模化生產、質量標準研究、製品質量提升及套用領域拓展等方面不斷探索和創新。
主要發展方向
1、遺傳病及腫瘤的基因治療新藥研究開發；
2、發展哺乳動物細胞無血清培養技術、工藝、產品及相關項目；
3、發展新型檢測技術、活細胞特性檢測試劑盒開發，如活細胞的microRNA活性檢測試劑盒等；
4、發展新型病毒載體，用於基因檢測、病毒檢測、基因轉移、基因表達，如流感假病毒、HIV假病毒等；
5、發展新型動物疾病模型，如慢性B型肝炎小鼠模型等。
業務範圍
涉及基於無血清哺乳動物細胞培養的病毒載體、病毒疫苗、病毒樣顆粒、重組蛋白以及細胞製品的早期開發、生產和技術服務。
承擔和參與的國家課題項目
1、國家重點基礎研究發展計畫(973 計畫)，課題編號:No. 2004CB518806
2、863重大關鍵技術項目:病毒載體的規模化生產關鍵技術研究，課題編號:2007AA021202
3、國家科技支撐計畫子課題：Vero細胞、BHK細胞、CHO細胞懸浮培養的馴化以及安全性的評價，課題編號:2008BAI54B04-08
4、863計畫“基因治療關鍵技術及產品研發”項目“遺傳性疾病基因治療方案研究”課題，課題編號：2012AA020810
5、國家自然科學基金支持課題2項，合作單位，解放軍第302醫院，HBV相關課題；
地方政府課題支持項目
AAV載體規模化製備技術平台項目，獲北京市科委的資金支持
AAV8-HBV1.3結合p53基因敲除小鼠製備肝癌模型的研究，獲北京經濟技術開發區管委會支持課題
獲得的資質
2006年，公司獲得北京市高新技術企業認證。
2009年，公司獲得北京市中關村高新技術企業認證。
2011年12月30日，公司獲北京經濟技術開發區管委會授牌“病毒載體公共服務平台”。
2012年11月6日，北京亦莊生物醫藥園獲得北京市戰略性新興產業科技成果轉化基地認定，園區項目《生物大分子純化技術服務平台建設》和參與申報的五加和《AAV載體規模化製備技術平台》、安泰吉《重組蛋白質哺乳動物細胞高效表達系統平台的創立》獲得了此次評定市科委的資金支持。
發展歷程
2005年12月30日，公司成立，董小岩博士擔任董事長兼首席科學家。
2005年12月30日，公司聘請吳小兵教授為公司科學技術顧問。
2006年初，參加國家重點基礎研究發展計畫(973計畫)，課題編號:No. 2004CB518806。
2007年初，參加863重大關鍵技術項目：病毒載體的規模化生產關鍵技術研究，課題編號:2007AA021202。
2007年10月28日， 公司中試車間建成並投入運營。
2008年初，參加國家科技支撐計畫子課題：Vero細胞、BHK細胞、CHO細胞懸浮培養的馴化以及安全性的評價，課題編號:2008BAI54B04-08。
2009年10月8日，公司擴張實驗室至600平方米。
2010年9月25日，公司完成AAV載體反向感染方法研究，該論文被ploS One收錄發表。
2010年11月，公司完成人類B型肝炎小鼠動物模型研究工作，該論文被病毒學報收錄發表，並被評為年度優秀論文。[高嗜肝性8型重組腺相關病毒體內轉導法製備B型肝炎病毒持續感染小鼠模型。病毒學報,2010,26(6):424~430]。該工作的完成，標誌著公司所開發的人類B型肝炎小鼠動物模型產品獲得初步成功。
2011年6月29日，中共中央政治局常委、全國政協主席賈慶林來到北京經濟技術開發區，在北京亦莊生物醫藥園進行調研，並考察了我公司。
2011年10月18日，公司在北京亦莊生物醫藥園擴張上游實驗室200平方米。
2011年11月30日，公司完成套用AAV載體反向感染法研究開發高通量miRNA活性譜檢測試劑盒的開發工作，所涉及的論文被ploS One收錄發表。該工作的完成，標誌著公司所開發的高通量miRNA活性譜檢測試劑盒產品獲得初步成功。
2011年12月18日，公司司完成B型血友病新型基因治療藥物研發的中試生產工作。
該項目套用新型AAV載體，可經靜脈注射藥物，藥物將可靶向地到達患者的肝臟而發揮治療該疾病的作用。預期可通過藥物的一次性靜脈注射而徹底治癒該遺傳病。
2011年12月30日，公司獲得北京經濟技術開發區管委會授牌“病毒載體公共服務平台”。
2012年1月30日，北京市委書記劉淇到北京亦莊生物醫藥園調研期間，考察參觀了公司的病毒載體公共服務平台實驗室。
2012年2月2日，公司發表的論文High-Throughput Functional MicroRNAs Profiling by Recombinant AAV-Based MicroRNA Sensor Arrays的團隊獲Springer出版公司邀請參與書籍Methods in Molecular Biology的核酸的檢測的章節的寫作。
2012年2月，參加863計畫“基因治療關鍵技術及產品研發”項目“遺傳性疾病基因治療方案研究”課題，課題編號：2012AA020810。
2012年11月6日，北京亦莊生物醫藥園獲得北京市戰略性新興產業科技成果轉化基地認定，園區項目《生物大分子純化技術服務平台建設》和參與申報的五加和《AAV載體規模化製備技術平台》、安泰吉《重組蛋白質哺乳動物細胞高效表達系統平台的創立》獲得了此次評定市科委的資金支持。
代表性文章
Conserved Fiber-Penton Base Interaction Receptor Interaction of Adenovirus Provides Insight into Cryo-Electron Microscopy of the Structure Revealed by Nearly Atomic Resolution.J. Virol. 2012, 86(22):12322.
High-Throughput Functional MicroRNAs Profiling by Recombinant AAV-Based MicroRNA Sensor Arrays. PLoS ONE 7(1): e29551.
Establishment of an AAV Reverse Infection-Based Array. PLoS ONE 5(10): e13479.
建立分泌型螢光素酶基因標記的原位肝癌模型及用於干擾素β基因治療評價。 生物工程學報, 2012, 28(10): 1236-1244.
用rAAV8-1.3HBV製備兩種品系小鼠B型肝炎病毒感染模型的比較研究。病毒學報, 2012, 28(5): 541-547.
用rAAV8-1.3HBV介導的HBV持續感染小鼠模型評價核苷酸類似物抗HBV效果的初步探索。生物工程學報, 2012, 28(11):
重組8型腺相關病毒介導雙螢光素酶基因在小鼠體內的表達。中華實驗和臨床病毒學雜誌, 2012, 26(6):
高嗜肝性8型重組腺相關病毒體內轉導法製備B型肝炎病毒持續感染小鼠模型。病毒學報, 2010, 26(6): 424~430.
產品與技術服務
重組病毒產品
公司提供攜帶EGFP、Gluc、Fluc、LacZ等報告基因及空殼的腺病毒產品（Ad5、Ad5/F35）和腺相關病毒產品（AAV1、AAV2、AAV5、AAV8、AAV9）。
載體質粒產品
公司提供多種含有不同啟動子、polyA序列的載體質粒產品，用於包裝各種血清型的腺相關病毒。
製備動物模型新產品
rAAV8-1.3HBV是一種攜帶HBV超全長基因組的重組AAV8病毒。2010年董小岩等[病毒學報，2010, 246(6):424]首次報導了rAAV8-1.3HBV可以用於高效製備慢性HBV小鼠模型。將rAAV8-1.3HBV
經尾靜脈注射到正常的C57BL/6小鼠體內，用ELISA方法從3天開始即可在外周血中檢測到HBsAg和HBeAg，持續1年以上；用Q-PCR方法在血清中可以檢測到HBV DNA；血清中HBsAg和HBeAg的表達水平以及HBV DNA水平與rAAV8-1.3HBV的用量（1x10 ~ 1x10vg/只）呈正相關；Balb/c小鼠對於rAAV8-1.3HBV靜脈注射的反應與C57BL/6小鼠則明顯不同：用ELISA方法從3天開始即可在外周血中檢測到HBsAg，但2周后下降，至4周時消失，同時可檢測低水平的HBsAb；而HBeAg則長期持續存在。本產品是用免疫功能正常的小鼠，在出生後經尾靜脈注射rAAV8-1.3HBV製備的。它不是人鼠嵌合型小鼠，也不是轉基因小鼠。
產品特點：
成膜率高 | 當rAAV8-1.3HBV注射劑量達到1x10vg/只時，C57BL/6小鼠成模率達到100% |
均一性和穩定性好 | 注射相同劑量的rAAV8-1.3HBV時，小鼠血清中可持續檢測到HBsAg和HBeAg以及HBV DNA，水平高低相近，因此，模型的均一性好 |
量效關係良好 | 血清中HBsAg和HBeAg的水平以及HBV DNA水平與rAAV8-1.3HBV的注射量（1x10 ~ 1x10vg/只）呈正相關，使製備的HBV動物模型血清中HBsAg和HBeAg的水平以及HBV DNA水平可按實驗需求進行控制 |
適用範圍廣泛 | 可嘗試套用於其它實驗動物，具有在不同動物包括非人類靈長類動物中建立HBV動物模型的巨大潛力 |
建立HBV肝癌模型成為可能 | 將攜帶1.3個拷貝HBV基因組信息的重組腺相關病毒載體AAV8/HBV成功轉導免疫功能正常的小鼠，注射後隨著時間的延長，小鼠表現出典型肝癌特徵。 |
miRNA生物感測器
microRNA（簡稱miRNA）是一種細胞內源性的小ncRNA（Non-coding RNA，非編碼RNA），miRNA網路被發現是基因表達調控的重要層次，除了參與生長、發育、分化、凋亡等重要生物學過程，還與疾病的發生、發展、轉歸關係密切。本產品是使用病毒載體攜帶的miRNA的感測器，製備出包括了全部miRNA感測器種類的病毒載體，並將其包被在細胞培養孔板上，採用病毒反向感染法使包被在孔板上的病毒載體反向感染後加入的細胞，以用於miRNA感測器檢測細胞的miRNA活性。由於使用可分泌表達的、可受細胞內miRNA活性調節的報告基因Gluc做為指示待檢測指標的生物感測器，因此，可以通過檢測細胞培養上清中的Gluc表達水平來體現細胞內miRNA的適時的活性，並可多次反覆取上清進行檢測。
產品特點
本產品可實時、連續、動態檢測活細胞內miRNA活性譜的變化。
該產品檢測的是活細胞的miRNA活性而不是miRNA的拷貝數，這與其它方法不同。
本方法具有方法特異、敏感、使用過程簡便、採購成本和使用成本均低廉、費用便宜、全自動獲取大量或海量數據結果、通用性強、成功率高、結果可信等特點。
可用於藥物篩選、及其它干預因素對miRNA活性的影響研究。
該產品為miRNA活性檢測方法帶來了技術突破，將極大地促進相關行業的發展，將為醫藥、衛生事業帶來革命性進展。
通過產品的生產製備流程質量控制，該產品質量穩定、品質均一性好，檢測結果可重複性好。
更多產品
包括：磷酸鈣轉染Kit、各種含血清和無血清的細胞培養液、Ad5 TCID50 Kit、RCA(PCR法) Kit、腺病毒純化Kit、AAV2純化Kit、DRase核酸酶、Gaussia Luciferase檢測試劑和AAV反向感染陣列等。
技術服務
五加和分子醫學研究所採用自主創新的無血清懸浮生產工藝，為客戶生產高質量的重組病毒載體， 具體包括腺病毒載體（Ad5和Ad5/F35）、腺相關病毒載體（AAV1、AAV2、AAV5、AAV6、AAV7、AAV8、AAV9）、慢病毒載體、 逆轉錄病毒載體、單純皰疹病毒載體，也可以根據客戶的要求，採用經典的有血清培養方式進行病毒的製備和純化。
五加和分子醫學研究所擁有：從實驗室規模的培養瓶（皿）、懸瓶到中試規模的滾瓶、搖瓶、哺乳動物細胞生物反應器等一系列細胞培養設備設施和技術；高效的病毒和重組蛋白生產設備設施和工藝技術；完善的下游病毒和重組蛋白分離純化設備設施和工藝技術；系統的病毒載體質量控制和質量檢定體系、方法和流程。能夠為基礎研究、臨床前研究和早期臨床研究提供高質量的病毒載體
合作單位
研究所技術團隊從事病毒載體研究開發近20年，是國內堅持此方向最持久的團隊，技術和質量上精益求精。研究所為客戶提供了從實驗室規模質量的到臨床試驗用中試生產規模化質量的病毒載體CRO技術服務，目前已有300餘家國內外客戶。包括：
中科院生物物理所、中科院上海巴斯德研究所、中科院昆明動物所、北京生命科學研究所、北京蛋白質組研究中心、香港大學、北京大學醫學部、中國科學技術大學、復旦大學、澳大利亞阿德萊德大學、軍事醫學科學院、北京師範大學、上海交通大學、中南大學湘雅醫學院、第三軍醫大學、解放軍疾病預防控制中心、北京大學人民醫院、中國醫學科學院病原所、中國藥品食品檢定研究院、北京出入境檢驗檢疫局、CDC病毒所、解放軍總醫院、GSK等國內外科研機構。合作者及客戶的論文發表在包括Hepatology、JV、JI、Immunol Lett、Vaccine、NATURE CLINICAL PRACTICE NEUROLOGY、Neurobiology of Aging、Brain Behavior and Immunity、Mol Cancer Ther、Current Eye Research、Vision Res、BBRC、PLoS ONE等學術雜誌上。
人文理念
理想：五加和的理想是為人類發明和製造用得起的好藥；
責任：五加和人的責任是讓我們的親人、朋友、社會、國家因為有我們的存在和努力而變得更好；
團結：五加和的團隊要團結進取，視同事為親人，走共同富裕的道路；
奉獻：五加和倡導“默默耕耘，勇於奉獻”的精神，讓努力工作、有貢獻的人獲得物質和精神的雙豐收，努力形成良好的公司文化氛圍；
堅持：五加和人認準的目標就一定堅持到底，徑直奔向我們的理想和目標，決不回頭。即便我們無法改變我們的社會現狀，那我們就從改善我們的企業做起，讓我們把五加和創造得更美好，並發展壯大。我們相信，我們堅持不懈的努力能完善我們的社會。我們有信心認為，只要我們堅持，我們的國家、我們的社會和人民將越來越好！
