《化妝品中4-氨基聯苯及其鹽的檢測方法》是2012年1月18日國家食品藥品監督管理局發布施行的地方法規。
基本介紹
- 中文名：化妝品中4-氨基聯苯及其鹽的檢測方法
- 發布單位：國家食品藥品監督管理局
- 發布時間：2012年1月18日
- 字號：國食藥監保化[2012]13號發布。
拼音,範圍,方法提要,試劑與材料,儀器,分析步驟,測定,
拼音
huàzhuāngpǐnzhōng4-ānjīliánběnjíqíyándejiǎncèfāngfǎ
《化妝品中4-氨基聯苯及其鹽的檢測方法》由國家食品藥品監督管理局於2012年1月18日國食藥監保化[2012]13號發布。
範圍
本方法規定了化妝品中4-氨基聯苯及其鹽的液相色譜/串聯質譜測定方法。
本方法適用於化妝品中4-氨基聯苯及其鹽的測定，其檢測限為1.0μg/kg，定量限為3.3μg/kg。
方法提要
樣品中禁用芳香胺4-氨基聯苯及其鹽，通過超聲提取，液液萃取及固相萃取小柱淨化並濃縮後，用適當的有機溶劑定容，經液相色譜/串聯質譜測定，以內標法定量。
試劑與材料
3.1甲醇：色譜純。
3.2乙腈：色譜純。
3.3甲酸：色譜純。
3.4正己烷：分析純。
3.5乙醚：分析純。
3.6氯化鈉飽和溶液。
3.7HLB固相萃取小柱或相當者：500mg/6mL。
3.830%甲醇水溶液：甲醇（3.1）+水=30+70。
3.9氨水：NH3含量25%～28%。
3.105%氨水甲醇溶液：氨水（3.9）+甲醇=5+95，現配現用。
3.114-氨基聯苯：CAS92-67-1，純度>99%。
3.124-氨基聯苯-D9：CAS344298-96-0，純度>99%。
3.134-氨基聯苯標準貯備液（1000μg/mL）：準確稱取標準物質10.0mg，用甲醇溶解,稀釋，定容至10mL，於-18℃下保存。
3.144-氨基聯苯標準工作溶液：分別取（3.13）標準貯備液，用甲醇稀釋定容，製成濃度為1000ng/mL的標準溶液，於-18℃下保存。臨用時用50%甲醇水溶液稀釋成500ng/mL、250ng/mL、125ng/mL、50ng/mL、25ng/mL、5ng/mL。
3.154-氨基聯苯-D9內標標準溶液：用50%甲醇稀釋內標標準品溶液，得到100ng/mL4-氨基聯苯-D9內標溶液。
3.16分別從4-氨基聯苯標準工作溶液（3.14）中分別吸取0.5mL溶液與0.5mL100ng/mL內標溶液（3.15）混合，製得內標4-氨基聯苯-D9濃度為50ng/mL，4-氨基聯苯分別為250ng/mL、125ng/mL、62.5ng/mL、25ng/mL、12.5ng/mL、2.5ng/mL的標準溶液。並根據需要配製成相應濃度的空白基質加標標準溶液。
儀器
4.1液相色譜-串聯質譜檢測器（配ESI離子源）。
4.2分析天平：感量0.1mg。
4.3渦旋混合器。
4.4離心機：轉速10000r/min,容量為10mL。
4.5樣品過濾器：0.2μmPTFE濾膜或相當者。
分析步驟
5.1化妝水、面霜、粉底類化妝品
稱取樣品0.2g（精確到0.001g），置於10mL具塞塑膠離心管中，加入1mL濃度為100ng/mL氘同位素標記的4-氨基聯苯（3.15）,再加入3mL氯化鈉飽和溶液（3.6），於渦旋混合器上使樣品分散，加入3mL乙腈（3.2），充分渦旋，並超聲提取30min，10000r/min離心10min，吸出上層清液於另一10mL具塞塑膠離心管中，下層氯化鈉飽和溶液用3mL乙腈（3.2）重複提取步驟一次，合併兩次乙腈提取液，往提取液中加入正己烷（3.4）2mL，渦旋離心，靜置分層，棄去上層正己烷溶液，再在乙腈層加入正己烷（3.4）2mL，渦旋離心，靜置分層，棄去上層正己烷溶液，轉移下層乙腈溶液至另一10mL玻璃刻度試管中，40℃水浴下用氮氣吹至近乾，並用30%甲醇水溶液（3.8）重新溶解、定容至2mL，並經0.2μm濾膜過濾後作為測定液上機測定。
5.2洗面乳、沐浴液類化妝品
稱取樣品0.2g（精確到0.001g），置於10mL具塞塑膠離心管中，加入1mL濃度為100ng/mL氘同位素標記的4-氨基聯苯（3.15）,再加入3mL氯化鈉飽和溶液（3.6），於渦旋混合器上使樣品分散，加入3mL乙醚（3.5），充分渦旋，並超聲提取30min，10000r/min離心10min，吸出上層清液於另一10mL具塞塑膠離心管中，下層氯化鈉飽和溶液用3mL乙醚（3.5）重複提取步驟一次，合併兩次乙醚提取液，用氮氣吹至近乾，並用30%甲醇水溶液（3.8）2mL重新溶解，再加入8mL純水稀釋。
HLB固相萃取小柱（3.7），接上固相萃取裝置，小柱預先用10mL甲醇、10mL水進行活化、平衡。將待淨化的樣品溶液傾倒入固相萃取小柱，待樣品溶液自然流盡後，依次用10mL純水、5mL10%甲醇溶液淋洗小柱；待淋洗液自然流盡後，用吸球吹出小柱中的殘留液，用10mL5%氨水甲醇溶液（3.10）洗脫固相萃取小柱，收集洗脫液，40℃水浴下經氮氣吹至近乾，用30%甲醇水溶液（3.8）重新溶解、定容至2mL，並經0.2μm濾膜過濾後作為測定液上機測定。
5.3指甲油與口紅類化妝品
稱取樣品0.2g（精確到0.001g），置於10mL具塞塑膠離心管中，加入1mL濃度為100ng/mL氘同位素標記的4-氨基聯苯（3.15）,再加入3mL乙腈（3.2），於渦旋混合器上使樣品分散溶解，充分渦旋，並超聲提取30min，10000r/min離心10min，取上層清液於另一10mL具塞塑膠離心管中，下層樣品殘渣再用3mL乙腈（3.2）重複提取步驟一次，合併兩次乙腈提取液，往提取液中加入正己烷（3.4）2mL，渦旋離心，靜置分層，棄去上層正己烷溶液，再在乙腈層加入正己烷2mL，渦旋離心，靜置分層，棄去上層正己烷溶液，轉移下層乙腈溶液至另一10mL玻璃刻度試管中，40℃水浴下用氮氣吹至近乾，並用30%甲醇水溶液重新溶解、定容至2mL，並經0.2μm濾膜過濾後作為測定液上機測定。
測定
6.1液相色譜參考條件
以下為液相色譜參考條件：
a）色譜柱：C18，1.7μm，100mmí2.1mm（內徑），或相當者
b）柱溫：40℃；
c）流動相：0.3%甲酸水溶液+乙腈=75+25
d）洗脫程式：等度；
e）流速：0.5mL/min；
f）進樣量：2μL；
6.2質譜參考條件
以下為質譜參考條件：
a）電離源模式：電噴霧離子化；
b）電離源極性：正離子模式；
c）霧化氣：氮氣；
d）霧化氣壓力：45psi；
e）毛細管電壓：3500V；
f）乾燥氣溫度：325℃；
g）乾燥氣流速：5L/min；
h）鞘氣溫度：400℃；
i）鞘氣流速：12L/min；
j）監測方法：多反應監測（MRM）；
k）解析度：Q1（unit）Q3（unit）。
