功能克隆法

       功能克隆法，一種研究基因功能的方法。需要了解DNA所表達的蛋白質功能來確定序列，通過反義PCR來擴增cDNA，再進行對片段序列進行研究的一種方法。

功能克隆法，需要我們對通過基因表達出的蛋白質進行分析鑑定，找到缺陷或者具有明顯生理特徵的蛋白質，然後分離純化該蛋白質通過測序胺基酸序列，推測出可能的mRNA序列，設計引物，利用相關的DNA或cDNA做為模板來進行PCR擴增，最終得到目的片段，再對片段進行分離測序分析。這種操作方法也存在著局限性，操作過程也比較繁瑣，需要進行多步實驗才能完成，另外有很多經基因表達的蛋白質我們並不能精確的了解到底是什麼，即使了解也不一定能提取出的足夠的胺基酸來進行準確的測序，從而達不到反推出mRNA的目的。所以在實際的套用中並不經常用到,其他的相關克隆方法如:序列克隆法;定量螢光PCR等較為常用。