前列腺癌PIA-PIN-PCa惡性轉化中標誌性lncRNA功能及其調控網路研究

《前列腺癌PIA-PIN-PCa惡性轉化中標誌性lncRNA功能及其調控網路研究》是依託南昌大學，由王共先擔任項目負責人的地區科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：前列腺癌PIA-PIN-PCa惡性轉化中標誌性lncRNA功能及其調控網路研究
• 項目類別：地區科學基金項目
• 項目負責人：王共先
• 依託單位：南昌大學

項目摘要

前列腺癌(PCa)是影響老年男性生活質量和預期壽命的重要疾病。目前有學者提出增生性炎性萎縮(PIA)-前列腺上皮內瘤(PIN)-PCa惡性轉化可能是PCa發生的新模式。申請者前期研究也證實PIA與PCa密切相關。長鏈非編碼RNA(lncRNA)是目前研究熱點及新興領域，其參與了PCa發生、發展及轉移，同時也是PCa分子標誌物。申請者推測lncRNA可能也參與了PIA-PIN-PCa惡性轉化進程。本研究擬採用新一代lncRNA晶片檢測正常前列腺腺上皮、PIA、PIN和PCa組織中差異性表達lncRNA，分析其調控網路，並通過隨訪及檢測其表達，以尋找新的標誌性lncRNA；knockdown及過表達標誌性lncRNA後，體內外實驗觀察PCa細胞的增殖、侵襲與轉移能力的變化，明確其功能，為早期干預PCa疾病進程提供新的治療靶點；並為PIA-PIN-PCa惡性轉化模式提供新的科學證據。

結題摘要

主要研究項目1：利用高通量晶片技術獲得在前列腺癌（PCa）組織與癌旁正常組織中差異表達的長鏈非編碼lncRNA；驗證其中lncRNA：TCONS_00023979及其臨近基因PML的差異表達情況，探索TCONS對臨近基因PML的調控作用；對前列腺癌細胞的增殖、侵襲能力的影響。進行高通量lncRNA及mRNA混合基因晶片檢測並得到前列腺癌組織和癌旁正常組織的差異基因表達譜，篩選出其中的lncRNA分子作為研究對象。qRT-PCR方法檢測TCONS及其鄰近基因PML在前列腺癌組織中的表達水平。構建TCONS特異性的siRNA序列，轉染入DU145和LNCaP等前列腺癌細胞下調TCONS的表達水平，篩選干擾效果最佳的siRNA序列。檢測TCONS表達被干擾後對PML的mRNA和蛋白質表達水平的影響。檢測TCONS表達水平的下調對前列腺癌細胞生長增殖、侵襲能力的影響。結果：驟篩選結果提示TCONS可能是與前列腺癌相關的關鍵lncRNA分子之一，組織qRT-PCR驗證結果顯示：TCONS和PML在PCa組織中的表達水平均低於癌旁正常組織。下調TCONS的表達後，PML的mRNA和蛋白質表達水平也明顯下調。干擾TCONS的表達後可導致DU145、LNCaP等前列腺癌細胞的生長增殖、侵襲能力明顯增強。結論：我們新發現了一批與前列腺癌相關的mRNAs和lncRNAs。TCONS對臨近基因PML具有正性調控作用。TCONS能夠抑制前列腺癌細胞的增殖和侵襲。 主要研究項目2：類泛素化修飾可能對幹細胞的增殖與分化具有調控作用，而低濃度的MLN4924可能在幹細胞療法和組織再生學中具有一定的套用前景。MLN4924是首個NEDD8激活酶抑制劑。目前臨床試驗和基礎研究均針對該藥物的抗腫瘤作用。我們發現，MLN4924在納摩爾級別濃度下，可顯著刺激體外腫瘤幹細胞成球和體內人腫瘤細胞和小鼠胚胎幹細胞的成瘤與分化。MLN4924的刺激作用可能：（1）抑制c-Myc蛋白降解途徑而使之聚集；（2）某種機制促進EGFR二聚體化。最後，我們發現MLN4924可加速EGF介導的小鼠皮膚傷口癒合，以及在體外環境下促進上皮細胞遷移。綜上所述，本研究揭示了類泛素化修飾可能對幹細胞的增殖與分化具有調控作用，而低濃度的MLN4924可能在幹細胞療法和組織再生學中具有一定的套用前景。