利用SSOs演替進行PMI推斷的法醫學研究

《利用SSOs演替進行PMI推斷的法醫學研究》是依託中南大學，由蔡繼峰擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：利用SSOs演替進行PMI推斷的法醫學研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：蔡繼峰
• 依託單位：中南大學

項目摘要

腐敗屍體死亡時間（PMI）推斷是法醫工作難題和研究熱點。特定腐敗細菌（SSOs）與屍體腐敗進程關係密切。已有研究提示及本課題組採用大鼠屍體預實驗驗證，屍體上不同部位SSOs的分布具有特異性，在種類、數量等方面均呈現出一定的演替現象，有望為PMI的精確推斷提供新的思路和方法。本課題進一步的研究以豬為實驗模型，以屍體所處不同條件為對照，用標準取菌環法採集豬屍體口腔、鼻腔、眼周、肛周、生殖器、腹部、背部的SSOs，運用CFU計數法和ECO-BIOLOGO法，結合16S rDNA分子標記擴增、ROCHE-454高通量測序及QIIME程式分析，明確細菌種類及數量，用R軟體進行統計分析，建立多元線性回歸方程。全面獲取不同季節不同PMI豬屍體上SSOs的種類、分布及數量演替，探索利用SSOs進行PMI推斷的規律。在實際案例中選擇案情及PMI明確的約100例健康成人屍體上相應部位的SSOs進行驗證。

結題摘要

腐敗屍體死亡時間（PMI）推斷是法醫工作難題和研究熱點。特定腐敗細菌（SSOs）與屍體腐敗進程關係密切，廣泛存在於自然界中，有推斷PMI的潛能。本課題以SD大鼠、豬為實驗模型，以屍體所處不同條件為對照，使用無菌棉簽採集動物屍體口腔、鼻腔、眼周、肛周、生殖器、胸部、腹部、背部的SSOs，運用CFU計數法和ECO-BIOLOGO法，結合16S rDNA分子標記擴增、Miseq高通量測序及QIIME程式分析，選取有明顯變化趨勢的，用realtime-PCR TaqMan螢光探檢測，建立非線性回歸方程。在實際案例中選擇案情及PMI明確的約30例健康成人屍體上相應部位的SSOs進行驗證。屍體不同部位細菌群落演替隨時間進展發生的變化有相應的規律性，變形菌門豐度增高，厚壁菌門及擬桿菌門豐度逐漸下降。腐敗晚期屍體不同部位的細菌群落逐漸趨於相似，微生物多樣性與死亡間隔時間負相關。屍體不同部位細菌群落構成不同，眼周細菌多樣性較口腔及陰道低，直腸細菌多樣性最高。口腔的鏈球菌屬對早期PMI具有指示作用，Ignatzschineria菌屬、大腸桿菌和奇異變形桿菌對晚期PMI具有指示作用。直腸的普氏菌屬對早期PMI具有指示作用，變形菌屬對晚期PMI具有指示作用。環境中的生物及非生物因素會影響屍體腐敗：嗜屍性昆蟲活動加快屍體腐敗，也可以使腐敗微生物演替進程加快，但對微生物群落物種分類學構成無顯著影響；溫度與屍體腐敗速度正相關。人和大鼠的屍體之間的細菌演替規律有著很多的相似性，進一步證實了所得結論具有一定的普適性。